食用植物油DNA提取方法比较及优化研究
作者机构:青海大学农牧学院
出 版 物:《中国粮油学报》 (Journal of the Chinese Cereals and Oils Association)
年 卷 期:2024年
核心收录:
学科分类:0832[工学-食品科学与工程(可授工学、农学学位)] 08[工学] 083202[工学-粮食、油脂及植物蛋白工程]
摘 要:以油菜籽、芝麻和亚麻籽为原料,螺旋压榨法制油,采用乳化法、富集法、CTAB法、树脂试剂盒法和冷冻干燥法提取植物油DNA,并通过超微量可见分光光度计、实时聚合酶链式反应(PCR)、微卫星(SSR)分子标记评价DNA质量。结果表明CTAB法提取的DNA质量浓度高、纯度好、耗时短、起始油量低、费用低、适合分子分析。选择CTAB法,考察起始油量、有机化合物添加、裂解缓冲液组成、裂解和沉淀时间的提取效率。优化条件为最低起始油量100 μL,有机化合物添加:CTAB-氯仿:异戊醇(CTAB-C:I),裂解缓冲液组成:CTAB-β巯基乙醇-蛋白酶K(CTAB-βME-PK),裂解20 min,沉淀9 h。该方法成功地在7种精炼植物油中提取到适合分子溯源的DNA,为植物油可追溯性和真实性检测提供了技术支撑。