D930020B18Rik在小鼠精子发生过程中的表达特征及其潜在功能

作     者：吴勇 昌文林 田媛 叶鸣 张亚伟 张增 WU Yong;CHANG Wen-lin;TIAN Yuan;YE Ming;ZHANG Ya-wei;ZHANG Zeng

作者机构：长江大学附属荆州医院生殖科湖北荆州434000 深圳市龙华区人民医院产科广东深圳518109 北京大学深圳医院中心实验室广东深圳518036 

出 版 物：《中华男科学杂志》 (National Journal of Andrology)

年 卷 期：2024年第30卷第1期

页      面：9-17页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071008[理学-发育生物学] 

基　　金：湖北省自然科学基金青年项目(2021CFB285) 深圳市龙华区医疗卫生机构区级科研项目(2020001) 

主　　题：D930020B18Rik基因 精子发生 睾丸 小鼠 

摘      要：目的:揭示D930020B18Rik(RIKEN cDNA D930020B18)基因在小鼠和人各发育阶段睾丸的表达特征,探讨其在哺乳动物精子发生中的可能作用。方法:基于小鼠基因表达芯片筛选到睾丸高表达基因D930020B18Rik,利用实时定量RT-PCR、免疫组化、免疫印迹、免疫荧光等方法揭示其在小鼠和人睾丸中的表达特征,应用生物信息学分析及双荧光素酶分析、细胞周期同步化等方法进行初步的功能和分子机制验证。结果:D930020B18Rik在小鼠出生后前2周的睾丸组织中表达水平较低,且主要定位在精原细胞细胞质;从第3周开始直到性成熟,D930020B18Rik在睾丸持续高丰度表达,且主要定位在精母细胞、圆形精子和长形精子的细胞核,但是在成熟精子的细胞核表达缺失。进化树分析显示在哺乳动物中D930020B18Rik蛋白序列高度保守。基因富集生信分析提示D930020B18Rik及其同源蛋白,可能通过参与核质浓缩(NES=1.652,P0.01,FDR=0.153)、减数分裂(NES=1.960,P0.01,FDR0.001)、有丝分裂微管细胞骨架组成等(NES=1.903,P0.01,FDR=0.009)实现对哺乳动物精子发生的调控。通过双荧光素酶试验发现了转录因子klf5和foxo1可以识别和结合D930020B18Rik启动子,并分别发挥正向和负向转录调控作用。结论:D930020B18Rik在小鼠睾丸呈与精子发生高度相关的时空特异性表达,且主要定位在生精细胞的胞核,可能参与了精母细胞减数分裂和精子变形等过程。