罗氏沼虾神经细胞的原代培养及其在病毒研究中的应用

作     者：黄笑 王国浩 董宣 唐琼英 段虎 杨国梁 黄倢 

作者机构：湖州师范学院浙江省水生生物资源养护与开发技术研究重点实验室中国水产科学研究院水生动物繁育与营养重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛海洋科技中心海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室农业农村部海水养殖病害防治重点实验室青岛市海水养殖流行病学与生物安保重点实验室 江苏数丰水产种业有限公司 天津科技大学海洋与环境学院 

出 版 物：《渔业科学进展》 (Progress in Fishery Sciences)

年 卷 期：2024年第4期

页      面：187-194页

核心收录：

学科分类：0906[农学-兽医学] 09[农学] 

基　　金：青岛市市南区科技计划(2022-2-027-ZH) 国家现代农业产业技术体系(CARS-48) 中国水产科学研究院基本科研业务费(2020TD39)共同资助 

主　　题：罗氏沼虾 神经细胞 原代培养 传染性早熟病毒 

摘      要：细胞平台是研究病原–宿主互作的重要工具，虾类细胞系的缺少严重制约了虾类病毒学研究。传染性早熟病毒(IPV)是近年来发现的能够导致罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)性早熟和生长缓慢的一种新病毒，主要侵染罗氏沼虾神经组织。为建立罗氏沼虾病毒–宿主互作的体外研究平台，本研究采用木瓜蛋白酶消化健康罗氏沼虾的脑、眼柄、胸神经节和腹神经节，获取罗氏沼虾神经细胞，并利用L-15培养基进行离体培养。选择培养效果最佳的脑神经细胞进行IPV体外感染。结果显示，培养的原代细胞在含有谷氨酰胺的L-15培养基中生长良好，其中，从脑组织和眼柄X器官–窦腺复合体中分离出的细胞在体外存活时间可达15d，从胸腹神经节中分离出来的细胞在体外存活时间达9 d。在本研究所采用的感染方式和剂量条件下，脑细胞在感染96 h后检测到高载量的IPV。本研究建立了一种操作简便的罗氏沼虾神经细胞原代培养技术，为罗氏沼虾神经内分泌研究和病毒–宿主互作提供了基础数据和平台。