β-毒素促进金黄色葡萄球菌破坏血脑屏障的实验研究

作     者：王哲芬 尹靓 陈韬 吴静琳 郑颖 WANG Zhefen;YIN Jing;CHEN Tao;WU Jinglin;ZHENG Ying

作者机构：昆明医科大学第一附属医院神经内科昆明650032 云南省神经系统疾病临床医学研究中心昆明650032 

出 版 物：《陆军军医大学学报》 (Journal of Army Medical University)

年 卷 期：2024年第46卷第6期

页      面：578-586页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 07[理学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 071006[理学-神经生物学] 100103[医学-病原生物学] 100104[医学-病理学与病理生理学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金青年科学基金(82002196) 云南省科技厅基础研究计划昆医联合专项-面上项目(202101AY070001-105) 云南省神经系统疾病诊疗中心应用基础研究专项基金(ZX2019-03-05) 云南省重大科技专项计划(202102AA100061) 

主　　题：金黄色葡萄球菌 β-毒素 血脑屏障 血源性脑膜炎/脑微脓肿模型 血脑屏障细胞模型 

摘      要：目的 探讨β-毒素(Hlb)在金黄色葡萄球菌通过血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)中的作用。方法 通过血琼脂平板划线筛选金葡菌MW2的Hlb高产菌株,验证其对hCMEC/D3模拟BBB细胞模型通透性的影响。采用生物信息学分析筛选hlb基因完整的金葡菌菌株,利用同源重组的方法构建hlb敲除株,血琼脂平板法检测溶血活性改变。利用BBB细胞模型比较不同菌株对其通透性的影响,再将野生株与hlb敲除株经尾静脉注射构建小鼠血源性脑膜炎/脑微脓肿模型并比较感染72 h脑组织中菌载量。结果 金葡菌MW2的Hlb高产菌株对BBB细胞模型破坏导致BBB细胞模型通透性增加的能力较野生株明显增强。NCTC8325-4、COL和RN4220菌株hlb基因无噬菌体插入。成功构建NCTC8325-4Δhlb株,血平板证实敲除株的β-溶血缺失。NCTC8325-4Δhlb株对BBB模型细胞破坏导致BBB细胞模型通透性增加的作用较野生株下降,在小鼠血源性脑膜炎/脑微脓肿模型脑组织中菌载量也较野生株明显降低。结论 β-毒素具有促进金葡菌破坏BBB的作用。