白芨外泌体的分离及对体外人永生化角质形成细胞(Hacat)的凋亡保护研究

作     者：施建羽 李惠华 吴美芳 王伟 SHI Jianyu;LI Huihua;WU Meifang;WANG Wei

作者机构：福建省亚热带植物研究所福建省亚热带植物生理生化重点实验室福建厦门361006 

出 版 物：《中国农学通报》 (Chinese Agricultural Science Bulletin)

年 卷 期：2024年第40卷第6期

页      面：122-127页

学科分类：09[农学] 0901[农学-作物学] 

基　　金：厦门市重大科技计划项目“清肺解毒药用植物引种繁育及应用”(3502Z20211003) “基于特色中草药资源的功能性产品的开发”(3502Z20211006) 

主　　题：白芨 外泌体 人永生化角质形成细胞 凋亡 通路蛋白 

摘      要：探索鲜白芨(Bletilla striata)外泌体对体外人永生化角质形成细胞(Hacat)的生物活性,为其在护肤品上的开发提供数据。聚乙二醇(PEG)沉淀法提取白芨外泌体,透射电镜鉴定,BCA法测蛋白浓度;细胞计数试剂(Cell Counting Kit-8,CCK8)法检测Hacat细胞存活率,流式双染检测凋亡,蛋白印迹法检测凋亡相关通路蛋白。白芨外泌体呈茶杯状具双层膜,平均粒径69.63 nm,每克鲜白芨含外泌体浓度为5.24E+8 Particles,内含蛋白19.53μg;白芨外泌体(≥5μg/mL)可显著提高体外Hacat细胞存活率(P0.05);10μg/mL白芨外泌体处理48h,可显著降低H_(2)O_(2)氧化造模引起的Hacat细胞早凋亡、晚凋亡和总凋亡的细胞比例(P0.01),同时,模型组caspase-9和caspase-3表达显著上升,外泌体处理能显著降低其表达,而Bcl-2表达在组间无差异(P0.05)。PEG沉淀法分离的白芨外泌体,可促进体外Hacat生长,抑制H_(2)O_(2)引起的细胞凋亡且与蛋白caspase-9和caspase-3相关。