拟南芥基因转移新方法一真空渗入法的研究

作     者：巩振辉 何玉科 

作者机构：西北农业大学园艺系中国科学院上海植物生理研究所 

出 版 物：《西北植物学报》 (Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica)

年 卷 期：1996年第16卷第3期

页      面：277-283页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071001[理学-植物学] 07[理学] 

主　　题：拟南芥 基因转移 真空渗入法 方法技术 

摘      要：以拟南芥（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ）生态型Ｌａｎｄｓｂｅｎｇｅｒｅｃｔａ为试材，在含有所构建的ＣａＭＶＢａｒｉ－１株系基因ＶＩ的质粒（ｐＪＯ５３０Ｂａｒｉ－１ＧＶＩ）的根癌农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）菌种ＧＶ３１０１的介导下，研究了基因转移的新方法一真空渗入法。这种方法简便、快速、可靠且无需经过组织培养阶段即可获得大量转化植株。适宜的转化条件是将生长健壮，除去主苔后４－８ｄ的成株连同营养钵倒置浸入被渗入培养基稀释的农杆菌孢子悬浮液，其光密度为０．８，在吸力为１．７ｍ２／ｈ的真空泵下断续处理２ｍｉｎ／３０ｓ，置于２４ｈ连续光照下的气候室培养，待种子收获后在含有潮霉素的选择培养基选择转化植株．ＰＣＲ分析及ＥＬＩＳＡ检测，该方法的转化效果高达０．７１％。