大豆根瘤特异细胞类型启动子发掘与鉴定
作者机构:中国科学院东北地理与农业生态研究所 中国农业科学院作物科学研究所作物基因资源与育种全国重点实验室农业农村部粮食作物基因资源评价利用重点实验室 哈尔滨师范大学生命科学与技术学院 聊城大学农学与农业工程学院
出 版 物:《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)
年 卷 期:2024年
摘 要:为了深入了解大豆根瘤不同细胞类型中基因的表达,本研究在已发表的单细胞和空间转录组数据中筛挑出根瘤不同细胞类型特异表达的基因,以Williams 82大豆为研究材料,通过扩增预测基因起始密码子上游约2 kb的启动子片段,构建候选基因启动子驱动GUSPlus报告基因表达的重组质粒,利用发根农杆菌介导转化法,获得转基因根瘤。对根瘤进行GUS染色并通过石蜡切片在显微镜下验证基因表达位置,鉴定出一系列在根瘤表皮、外皮层、内皮层、维管束、固氮区的侵染细胞和非侵染细胞特异表达的基因。实验结果证明了利用空间转录组和单细胞测序技术可以准确的预测大豆根瘤不同细胞类型特异性表达的基因,该实验构建了一套完整的大豆根瘤特异性表达的启动子,为后续深入研究大豆根瘤的发育和功能提供了有力的工具和信息。