青钱柳三萜对3T3-L1细胞成脂分化的影响及TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的调节作用

作     者：潘朝旺 贺君宇 潘尚铠 石孟琼 徐小军 李洁 PAN Chaowang;HE Junyu;PAN Shangkai;SHI Mengqiong;XU Xiaojun;LI Jie

作者机构：鄂州职业大学医学院鄂州436000 肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室&三峡大学基础医学院宜昌443002 赣南医学院基础医学院赣州341000 三峡大学生物与制药学院宜昌443002 

出 版 物：《中药药理与临床》 (Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica)

年 卷 期：2024年第40卷第2期

页      面：72-78页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：湖北省教育厅科研项目(编号:B2022543) 湖北省鄂州市科技计划项目(编号:EZ01-002-20210132) 

主　　题：青钱柳三萜 3T3-L1细胞 脂质积累 Toll样受体/髓样分化因子88/核因子κB信号通路 

摘      要：目的:观察青钱柳三萜对3T3-L1细胞成脂分化的影响及Toll样受体/髓样分化因子88/核因子κB(TLR4/MyD88/NF-κB)信号通路的调节作用。方法:采用MTT法测定青钱柳三萜对3T3-L1细胞增殖活性的影响;油红O染色分析3T3-L1细胞脂肪积累;生化法检测3T3-L1细胞中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)的含量;ELISA法检测上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-4和IL-10含量;Real-time PCR法测定细胞中Tlr4、Myd88、Nfkbp65、Tnfa、Il1b、Il6、Il4和Il10的mRNA表达;Western blot法测定细胞中TLR4、MyD88、核因子κB抑制因子α(IκBα)、p-IκBα、核因子κB抑制物激酶β(IKKβ)、p-IKKβ及胞质和胞核中NF-κBp65蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组脂质积累,细胞中TC、TG含量,细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6含量明显升高,IL-4、IL-10含量明显降低;细胞中Tlr4、Myd88、Nfkbp65、Tnfa、Il1b、Il6 mRNA和TLR4、MyD88、p-IκBα、p-IKKβ、胞核中NF-κBp65蛋白表达明显上调,p-IκBα/IκBα、p-IKKβ/IKKβ比率明显升高;细胞中Il4、Il10 mRNA和胞质中NF-κBp65蛋白表达明显下调(P0.01);与模型对照组比较,青钱柳三萜可显著抑制3T3-L1细胞中脂质积累,降低细胞中TC、TG含量及上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6含量,升高上清液中IL-4和IL-10含量,下调细胞中Tlr4、Myd88、Nfkbp65、Tnfa、Il1b、Il6 mRNA表达,下调TLR4、MyD88及胞核中NF-κBp65蛋白表达和p-IκBα/IκBα、p-IKKβ/IKKβ比率,上调细胞中Il4、Il10 mRNA表达和胞质中NF-κBp65蛋白表达(P0.05或P0.01)。结论:青钱柳三萜对3T3-L1细胞成脂分化具有良好的抑制作用,其作用机制与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路激活、减轻脂肪细胞炎症反应、抑制TNF-α、IL-1β、IL-6、TC、TG生成和脂质积累,促进IL-4、IL-10生成有关。以上结果显示了青钱柳三萜在肥胖防治上良好的应用前景。