人苯丙氨酸羟化酶突变体p.R243Q、p.R241C和p.Y356X的体外表达及功能研究

作     者：庞永红 高翔羽 袁振亚 黄辉 王增芹 彭磊 李逸群 刘杰 刘冬 陈桂荣 PANG Yong-Hong;GAO Xiang-Yu;YUAN Zhen-Ya;HUANG Hui;WANG Zeng-Qin;PENG Lei;LI Yi-Qun;LIU Jie;LIU Dong;CHEN Gui-Rong

作者机构：徐州医科大学附属徐州妇幼保健院江苏徐州221009 东南大学附属徐州医院新生儿科江苏徐州221009 

出 版 物：《中国当代儿科杂志》 (Chinese Journal of Contemporary Pediatrics)

年 卷 期：2024年第26卷第2期

页      面：188-193页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100202[医学-儿科学] 10[医学] 

基　　金：徐州市科学技术局社会发展项目(KC20081) 江苏省卫生健康委员会妇幼健康科研项目(F202058) 江苏省妇幼保健协会科研课题(FYX201906) 徐州医科大学科研课题(2018KJ19)。 

主　　题：苯丙氨酸羟化酶缺乏症 突变体 体外表达 细胞 

摘      要：目的分析3种苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase,PAH)突变体(p.R243Q、p.R241C和p.Y356X)的体外表达,确定3种突变体的致病性。方法利用生物信息学技术预测PAH突变体对PAH蛋白结构和功能的影响。构建相应的PAH突变型质粒,在人胚胎肾细胞HEK293T中进行表达,采用定量逆转录聚合酶链反应检测3种PAH突变体的mRNA表达水平,利用蛋白质印迹法与酶联免疫吸附试验检测突变体的PAH蛋白表达水平。结果生物信息学分析预测结果显示,3种突变体均具备致病性。突变体p.R243Q和p.R241C质粒在HEK293T细胞中的mRNA表达水平与野生型类似(P0.05),而p.Y356X突变体质粒的mRNA表达水平明显下降(P0.05)。结论p.R243Q、p.R241C和p.Y356X降低真核细胞中PAH蛋白的表达量,其中p.R241C和p.Y356X还影响PAH蛋白的功能,这3种PAH突变体均为致病性突变。