油梨根腐病菌的分离鉴定及其内生性拮抗菌的筛选鉴定

作     者：唐丽珠 胥梦洋 黄少鹏 刘钰 李萃玲 吴凡 冯顺 李茂富 

作者机构：海南大学热带农林学院(农业农村学院乡村振兴学院)海南省热带园艺作物品质调控重点实验室 抚州市烟草公司黎川分公司 海南大学三亚南繁研究院 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2024年

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 090401[农学-植物病理学] 090402[农学-农业昆虫与害虫防治] 

基　　金：国家自然科学基金—其他项目(RZ2300004402) 海南省农业农村部科研项目(RZ2300003261)共同资助 

主　　题：油梨根腐病 病原菌 内生真菌多样性 拮抗真菌 

摘      要：根腐病是限制油梨产业健康发展的关键因子之一，严重阻碍着油梨的生产和发展。本研究为明确油梨根腐病病原菌种类及特征，采用组织分离法从发病典型的油梨根部进行病原菌分离纯化。结果表明，此次引发油梨根腐病的病原菌为有害红皮孔菌A20 (Pyrrhoderma noxium )；有害红皮孔菌A20对油梨苗具备侵染性，符合Koch’s假设验证。有害红皮孔菌A20菌丝生长的最适温度为25 ℃～28 ℃；适宜pH为4～9；有害红皮孔菌A20在盐浓度0%～8%的培养基上，菌落直径逐渐缩小至菌丝停止生长；有害红皮孔菌A20经紫外辐射10～100 min后，菌丝仍保持良好生长。另外，为分离得到潜在的油梨根腐病生防菌资源，本研究采用组织匀浆法对健康与患病油梨的组织部位进行内生真菌的分离纯化，利用形态学结合分子生物学(ITS)鉴定，分析健康与患病油梨内生真菌的组成多样性，进一步采用对峙平板法筛选拮抗内生真菌。结果表明，分离获得的油梨内生真菌辛普森(Simpson)多样性指数为0.878，香农(Shannon)多样性指数为3.324；内生真菌通过ITS序列鉴定划分为12个OTU。从分离获得的内生真菌中筛选出最优拮抗真菌A-6 (Clonostachys rosea)对有害红皮孔菌A20的菌丝抑制率高达(82.59±0.73)%。本研究结果揭示了油梨根腐病的致病因子，并评估了油梨内生真菌的多样性，明确油梨内生真菌的种类结构，挖掘其优质生防菌菌种资源，为生防菌的筛选及应用提供参考。