调脾安肠方对裸鼠结肠癌肝转移灶miR-34a-5p、Notch1/NF-κB表达的影响

作     者：王玉坤 孙适然 张津铖 程志强 WANG Yukun;SUN Shiran;ZHANG Jincheng;CHENG Zhiqiang

作者机构：北京中医药大学中日友好医院临床医学院100029 中日友好医院中西医结合肿瘤内科 

出 版 物：《环球中医药》 (Global Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2024年第17卷第3期

页      面：407-413页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：北京市自然科学基金(7212194) 中日友好医院高水平医院临床业务费专项临床研究项目(2022-NHLHCRF-LX-02-0109) 

主　　题：结肠癌肝转移 中药复方 调脾安肠方 miR-34a Notch1 核转录因子-κB p65 药理机制 

摘      要：目的探讨调脾安肠方对裸鼠结肠癌肝转移(colorectal cancer liver metastasis,CLM)灶组织中MicroRNA-34a-5p(miR-34a-5p)及其靶基因Notch1/核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)通路表达的影响。方法选取30只雄性Balb/c裸鼠随机分为空白组、模型组、中药组,每组10只。脾脏原位注射HCT-116人结肠癌细胞(细胞数约为1×107个/mL)法构建CLM模型。中药组在CLM造模完成2周后开始调脾安肠方(2 g/mL,每日0.2 mL)灌胃2周,空白组和模型组同期予等体积0.9%生理盐水灌胃。苏木素—伊红染色观察肝转移灶病理组织形态;蛋白免疫印迹法测定肝转移灶Notch1、NF-κB p65蛋白水平;实时荧光定量PCR测定肝转移灶miR-34a-5p及Notch1、NF-κB p65 mRNA水平。结果与模型组比较,中药组裸鼠镜下病理转移灶面积明显减小,核分裂像减少,提示调脾安肠方抑制了结直肠癌细胞在肝脏的定植和迁移。与空白组比较,模型组肝转移灶中miR-34a-5p含量显著降低(P0.01),Notch1、NF-κB p65蛋白表达升高(均P0.05),Notch1、NF-κB p65的mRNA表达显著升高(均P0.01)。与模型组比较,中药组Notch1蛋白及mRNA表达降低(P0.05),NF-κB p65的mRNA表达显著降低(P0.01)。miR-34a-5p与Notch1 mRNA在结肠癌肝转移灶组织中表达水平呈负相关(r^(2)=0.8845,P0.05),Notch1与NF-κB p65在结肠癌肝转移灶组织中mRNA表达水平呈显著正相关(r^(2)=0.9291,P0.01)。结论中药复方调脾安肠方能抑制裸鼠结肠癌肝转移灶形成,其机制可能与通过抑癌基因miR-34a-5p靶向负性调节Notch1/NF-κB通路表达有关。