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外源vpl1基因对香菇双核菌丝体木质素降解酶活性和基因表达的影响

作     者:游潇轩 宋晓霞 戈永杰 刘建雨 张美彦 尚晓冬 宋春艳 

作者机构:上海海洋大学食品学院 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部应用真菌资源与利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心 

出 版 物:《菌物学报》 (Mycosystema)

年 卷 期:2024年第7期

页      面:69-81页

核心收录:

学科分类:09[农学] 0902[农学-园艺学] 090202[农学-蔬菜学] 

基  金:上海市食用菌产业技术体系[沪农科产字(2023)第9号]~~ 

主  题:香菇 遗传转化 多功能过氧化物酶 异源表达 

摘      要:为探索刺茎侧耳多功能过氧化物酶vpl1基因在香菇菌丝体中的异源表达及功能,对比分析了野生型双核菌丝体与拥有1个或2个转化子的双核菌丝体在木质素降解酶活性和基因表达上的差异。首先,经过转化子筛选和功能验证,筛选出3个具有vpl1基因的香菇t-Asm136单核转化子。其次,将3个单核转化子与其野生型w-Asm136单核菌丝体分别与实验室已有的香菇t-Bsm83单核转化子与其野生型w-Bsm83单核菌丝体进行单单杂交,获得1个纯野生型双核菌丝体、4个单转化子双核菌丝体和3个双转化子双核菌丝体。最后,仅野生型、1个单转化子和2个双转化子双核菌丝体能在木屑培养基上正常生长。这4个双核菌丝体在木屑培养基上Lac、MnP和VP酶活和对应基因的表达量不同,其中vpl1的导入使双核转化子vpl1基因上调了2–12倍,MnP酶活上调13–30倍,mnp2a表达量上调4–18倍,mnp2b表达量上调6–11倍。证实了vpl1的导入能够增强MnP的酶活力和基因的表达水平。

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