靶向人表皮生长因子受体2嵌合抗原受体T(HER2-CAR-T)细胞毒性作用的体内外验证

作     者：张仪婷 席文锦 王鹏举 赵晓娟 郑瑞 梁思辛 蒙若彤 阎博 杨安钢 ZHANG Yiting;XI Wenjin;WANG Pengju;ZHAO Xiaojuan;ZHENG Rui;LIANG Sixin;MENG Ruotong;YAN Bo;YANG Angang

作者机构：空军军医大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032 空军军医大学基础医学院免疫学教研室陕西西安710032 延安大学生命科学学院陕西延安716000 

出 版 物：《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期：2024年第40卷第4期

页      面：289-295页

学科分类：100405[医学-卫生毒理学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 100102[医学-免疫学] 100214[医学-肿瘤学] 100215[医学-康复医学与理疗学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81972870) 国家肿瘤生物学重点实验室自主课题(CBSKL2022ZZ20) 陕西省自然科学基础研究计划(2022JM-485) 

主　　题：安全性 毒理学 靶向人表皮生长因子2嵌合抗原受体T(HER2-CAR-T)细胞 集落形成实验 溶血 血管刺激性 器官毒性 

摘      要：目的 对靶向人表皮生长因子受体2嵌合抗原受体T(HER2-CAR-T)细胞进行毒理学评估,为其后期HER2-CAR-T细胞治疗的临床上评估提供安全性依据。方法 利用重组慢病毒载体制备HER2-CAR-T细胞,采用软琼脂集落形成实验,观察HER2-CAR-T细胞集落形成情况并对集落形成率进行统计分析;将HER2-CAR-T细胞悬液与兔红细胞悬液共孵,通过直接观察法以及酶标仪检测法评估红细胞溶解情况;对雄性新西兰兔耳缘静脉注射HER2-CAR-T细胞制剂,通过组织切片染色观察HER2-CAR-T细胞对动物血管的刺激作用;以pMD 2.G载体上的水泡性口炎病毒囊膜糖蛋白(VSV-G)基因为目标序列,利用荧光定量PCR进行慢病毒载体安全性的验证;取接受HER2-CAR-T细胞输注的小鼠心、肝、肺、肾,HE染色观察其病变情况。结果 成功制备了HER2-CAR-T细胞,这些细胞在体外不具备软琼脂集落形成能力,HER2-CAR-T细胞制剂对新西兰兔红细胞不产生溶血现象。新西兰兔耳缘静脉输注HER2-CAR-T细胞后未发现明显血管刺激反应,也未检测到VSV-G的特异性扩增,治疗组小鼠心、肝、肺、肾组织未见明显病变。结论 所制备的HER2-CAR-T细胞具有可靠安全性。