人冠状病毒OC43感染性克隆的构建

作     者：唐晴 王蓓 朱英霞 杜作苑 雷晓波 黄鹤 TANG Qing;WANG Bei;ZHU Ying-xia;DU Zuo-yuan;LEI Xiao-bo;HUANG He

作者机构：中国医学科学院病原生物学研究所北京102629 

出 版 物：《现代生物医学进展》 (Progress in Modern Biomedicine)

年 卷 期：2024年第24卷第1期

页      面：1-5页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：国家重点研发专项(2020YFA0707600) 国家自然科学基金项目(82071795) 

主　　题：人冠状病毒OC43 感染性克隆 反向遗传学 

摘      要：目的:构建携带绿色荧光报告基因的人冠状病毒OC43感染性克隆。方法:设计带有绿色荧光蛋白的人冠状病毒OC43感染性克隆基因组序列,分段合成后利用融合聚合酶链式反应等方法得到8个亚基因组片段,通过酵母转化关联重组技术获得重组质粒,转染HEK-293T细胞进行病毒拯救,收获转染细胞培养上清感染靶细胞分析病毒拯救情况。结果:获得人冠状病毒OC43感染性克隆重组质粒,将该质粒转染细胞后成功获得携带绿色荧光蛋白报告基因的人冠状病毒OC43重组病毒。结论:成功构建了人冠状病毒OC43感染性克隆并获得重组病毒,为针对冠状病毒的基础和应用研究提供了有效工具。