shRNA沉默Bmi-1质粒构建及对鳞癌细胞ECA109增殖的影响

作     者：周明 耿松梅 ZHOU Ming;GENG Song-mei

作者机构：西安交通大学第二附属医院皮肤科西安710004 

出 版 物：《中国医学科学院学报》 (Acta Academiae Medicinae Sinicae)

年 卷 期：2015年第37卷第1期

页      面：17-22页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81372912) 教育部新世纪人才支持计划(NCET-10-0673) 

主　　题：Bmi-1 shRNA ECA109 鳞状细胞癌 

摘      要：目的研究shRNA沉默Bmi-1基因对鳞癌细胞ECA109增殖变化的影响,探讨Bmi-1基因在鳞癌细胞增殖中的作用。方法采用RT-PCR和Western blot法分别检测Bmi-1在Fibroblast细胞、Hacat细胞、A431细胞、ECA109细胞中的表达。构建重组质粒GPU6/GFP/Neo-sh Bmi-1,脂质体转染ECA109细胞后,检测细胞中Bmi-1表达变化。MTT法检测转染前后细胞抑制率,流式细胞仪检测转染前后细胞周期的变化。结果与Fibroblast细胞和Hacat细胞相比,Bmi-1在鳞癌细胞系A431、ECA109中含量明显升高。重组载体GPU6/GFP/Neo-sh Bmi-1构建成功,转染ECA109细胞后Bmi-1表达明显降低(P0.05)。与对照组相比,转染后细胞增殖明显受到抑制(P0.05);G1期细胞明显增加(P0.05),S期细胞明显减少(P0.05)。结论 Bmi-1与细胞恶性增殖相关。在ECA109细胞中沉默Bmi-1,可改变细胞周期,从而抑制细胞增殖。