RhoA基因shRNA表达载体的构建及鉴定

作     者：杨开焰 陈道瑾 李小荣 文言广 

作者机构：中南大学湘雅三医院普外科 

出 版 物：《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期：2010年第26卷第7期

页      面：707-708页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

基　　金：湖南省科学技术厅科技计划项目(2008FJ3160) 

主　　题：RhoA shRNA 结肠癌 质粒 

摘      要：目的：构建针对RhoA基因的shRNA表达载体并进行鉴定。方法：针对人RhoA的mRNA序列，设计并合成编码的shRNA的两条寡核苷酸序列，经退火成互补双链，再克隆至pGPU6／GFP／Neo质粒，构建重组体pGPU6／GFP／Neo—RhoA，进行酶切及测序鉴定，然后脂质体转染LoVo细胞。荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达。结果：将合成的DNA序列退火后克隆到载体，酶切及测序证实质粒为所需的序列。结论：成功地构建了针对RhoA基因的shRNA表达载体，为下一步进行RNAi的相关研究奠定了基础。