长链非编码RNA DLG相关蛋白1-AS5在乳腺癌组织中的表达及对癌细胞增殖和侵袭的影响

作     者：陆凯 陆建菊 郭文利 黄建棋 Lu Kai;Lu Jianju;Guo Wenli;Huang Jianqi

作者机构：嘉兴市第一医院乳腺病科浙江嘉兴314001 

出 版 物：《中国药物与临床》 (Chinese Remedies & Clinics)

年 卷 期：2024年第24卷第2期

页      面：115-119,F0003页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：浙江省嘉兴市科技计划项目(2020AD30066) 

主　　题：乳腺肿瘤 RNA,长链非编码 细胞增殖 细胞侵袭 

摘      要：目的分析长链非编码RNA(lncRNA)DLG相关蛋白(DLGAP)1-AS5对乳腺癌细胞增殖、侵袭的影响及其分子机制。方法采用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析乳腺癌组织及正常组织中DLGAP1-AS5表达水平,观察DLGAP1-AS5表达水平与乳腺癌患者生存期的关系。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测4种乳腺癌细胞系:永生化乳腺上皮细胞(MCF-10A)、人乳腺癌细胞(MCF-7、HCC-1937)、人乳腺腺癌细胞(SK-BR-3)、人乳腺管癌细胞(BT-549)中DLGAP1-AS5表达水平。将DLGAP1-AS5过表达质粒或阴性对照质粒转染至MCF-7细胞,计为DLGAP1-AS5组和阴性对照组。采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)和Transwell实验检测MCF-7细胞的增殖和侵袭情况。采用starBase v3.0在线软件和双荧光素酶报告实验检测DLGAP1-AS5和miR-362-5p的靶向关系。qRT-PCR检测MCF-7细胞中miR-362-5p表达水平。蛋白质印迹实验检测MCF-7细胞中p38-丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路蛋白表达水平。结果与正常组织比较,乳腺癌组织中DLGAP1-AS5表达水平降低(P0.01)。与DLGAP1-AS5表达较低的乳腺癌患者比较,DLGAP1-AS5表达较高的乳腺癌患者总生存期和无病生存期均较长(P均0.01)。与MCF-10A比较,乳腺癌细胞系中DLGAP1-AS5表达降低(P0.01),MCF-7细胞中DLGAP1-AS5表达降低最明显(P0.01)。与阴性对照组比较,过表达DLGAP1-AS5后MCF-7细胞增殖能力减弱(P0.05),细胞侵袭能力降低(P0.01)。DLGAP1-AS5能够靶向结合miR-362-5p(P0.01)。与阴性对照组比较,过表达DLGAP1-AS5后MCF-7细胞中miR-362-5p表达降低(P0.01),p38-MAPK信号通路蛋白表达降低(P0.01)。结论DLGAP1-AS5在乳腺癌组织和细胞系中低表达,其表达水平与乳腺癌患者生存期相关。过表达DLGAP1-AS5可通过下调miR-362-5p表达抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖和侵袭。