蚕豆萎蔫病毒2的RT-LAMP检测方法的建立

作     者：秦艳红 王凤丽 张重义 刘红彦 刘玉霞 高素霞 文艺 李绍建 刘永康 张德胜 鲁书豪 赵正伟 王飞 鲁传涛 

作者机构：温县农业科学研究所 河南省农业科学院植物保护研究所 福建农林大学 

出 版 物：《植物病理学报》 (Acta Phytopathologica Sinica)

年 卷 期：2024年

核心收录：

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 090401[农学-植物病理学] 

基　　金：国家中药材产业技术体系（CARS-21） 河南省中药材产业技术体系（HARS-22-11-Z1） 河南省农业科学院基本科研业务费项目（2023ZC051） 

主　　题：山药和地黄 蚕豆萎蔫病毒2 逆转录环介导恒温扩增 快速检测 

摘      要：蚕豆萎蔫病毒2(broad bean wilt virus 2,BBWV 2)属于蚕豆病毒属(Fabavirus)，是地黄和山药上的重要病毒之一，严重影响这些中药材的产量和品质。本研究建立了BBWV2的环介导恒温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)检测方法。根据BBWV 2基因组RNA2上的小外壳蛋白(small coat protein,SCP)基因序列的保守区设计引物，对RT-LAMP的反应温度和时间进行了优化，最佳反应条件为60～65℃反应60min对其灵敏度、特异性和准确性进行了检测，RT-LAMP方法的灵敏度是常规PCR的10倍，为6.47×103拷贝·μL-1，可特异地检测出BBWV2，对田间地黄和山药检测的准确性高于常规PCR。本研究建立的RT-LAMP是一种特异、灵敏、快速、方便的BBWV 2检测方法，适用于基层科研单位对该病毒的准确检测和诊断。