香柠檬精油抗伪结核棒状杆菌作用及机制研究

作     者：符雪珍 李鑫灿 钱虹宇 吕红 吴婵玉 王晓涵 王小华 王芝英 周作勇 FU Xuezhen;LI Xincan;QIAN Hongyu;L Hong;WU Chanyu;WANG Xiaohan;WANG Xiaohua;WANG Zhiying;ZHOU Zuoyong

作者机构：西南大学动物医学院重庆402460 精华药业(成都)有限公司成都641423 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2024年第55卷第3期

页      面：1217-1227页

核心收录：

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家级大学生创新训练计划项目(202210635102) 重庆市自然科学基金(cstc2021jcyj-msxmX0884) 横向项目(F2023285) 

主　　题：伪结核棒状杆菌 香柠檬精油 抗菌作用 机制 

摘      要：伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis,Cp)感染可影响家畜尤其是反刍动物羊的生产性能,本文旨在筛选对Cp有抑杀活性的植物精油并研究其作用机制,为Cp感染防控提供参考。通过纸片扩散法从4种植物精油中筛选出能高效抑杀Cp的香柠檬精油(bergamot essential oil, BEO),采用刃天青指示剂微量肉汤稀释法测定BEO对Cp不同菌株的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)。通过体外试验评价BEO对Cp感染J774A.1巨噬细胞的影响。通过测定脏器载菌量、脾抗菌肽基因表达量和存活率综合评价BEO对Cp感染昆明系小鼠的保护作用。采用扫描电镜观察BEO作用后Cp菌体形态变化,并检测BEO作用后Cp的DNA泄漏以及毒力基因表达情况,初步研究BEO抗Cp机制。结果显示:BEO具有较强的抗Cp作用,其MIC为0.78~1.56μL·mL^(-1)。BEO可降低Cp感染小鼠肾、肝和腹水的细菌负荷(P0.01),上调Cp感染小鼠脾中抗菌肽Cramp、Bpifal 1、mBD2、mBD3和mBD4的mRNA表达水平(P0.01)。BEO处理可降低Cp对J774A.1巨噬细胞的感染率,提高被Cp感染小鼠的存活率(P0.05)。BEO处理使Cp细胞膜凹陷,菌体内DNA外渗增加(P0.05),以及下调毒力基因磷脂酶D(phospholipase D,pld)的表达(P0.01)。BEO能抑杀Cp,改善Cp对小鼠的感染程度,其机制可能与BEO损伤Cp细胞膜造成DNA泄漏并降低毒力基因pld的mRNA表达,以及促进Cp感染小鼠抗菌肽Cramp、Bpifal 1、mBD2、mBD3和mBD4的表达有关。