基于Mas/PKA/CREB通路探讨颈椎横突尖针刺法治疗后循环缺血性眩晕大鼠模型作用机制

作     者：欧小燕 柳刚 杨丽芳 文林月 汪生志 李娜 杨骏 张闻东 

作者机构：安徽中医药大学第一附属医院 安徽中医药大学第二附属医院 安徽中医药大学研究生院 

出 版 物：《北京中医药大学学报》 (Journal of Beijing University of Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2024年

核心收录：

学科分类：1005[医学-中医学] 100512[医学-针灸推拿学] 10[医学] 

基　　金：国家重点基础研究发展计划(973计划)项目(No.2010CB530505) 安徽省自然科学基金项目(No.1608085MH184) 安徽省重大疑难疾病中西医协同攻关项目(皖中医药发展秘70号) 全国中医药创新骨干人才培养项目(皖卫中医药发12号) 

主　　题：颈椎横突尖针刺 后循环缺血 眩晕 细胞凋亡 G蛋白偶联受体/蛋白激酶A/环磷腺苷效应元件结合蛋白通路 大鼠 

摘      要：目的：基于Mas原癌基因（Mas）/蛋白激酶A（PKA）/环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）通路探讨颈椎横突尖针刺法对后循环缺血性眩晕（PCIV）模型大鼠的作用机制。方法 将32只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、尼莫地平组、电针组，每组各8只。除假手术组外，其余各组大鼠均结扎右侧颈总动脉（CCA）和锁骨下动脉（SCA）建立PCIV模型，假手术组仅剥离右侧CCA和SCA，不予结扎直接缝合。尼莫地平组大鼠灌胃尼莫地平混悬液（12 mg/kg）；电针组大鼠选取第2颈椎（C2）、第4颈椎（C4）、第6颈椎（C6）横突尖针刺，于双侧C2、C6进行电针治疗，20 min/次；假手术组和模型组不予任何干预措施，连续干预14 d。观察各组大鼠右侧前庭神经核脑血流量、脑血流量下降率及跳台躲避时间，采用TUNEL染色法观察右侧脑干前庭神经核细胞凋亡情况，蛋白质印迹法检测右侧脑干前庭神经核的Mas、蛋白激酶A-C亚基同工型a（PKA-Ca）、CREB、磷酸化CREB（p-CREB）、B细胞淋巴瘤（Bcl）-2和Bcl-2相关X蛋白（Bax）的蛋白表达情况。结果 干预前，与假手术组对比，其余3组大鼠右侧前庭神经核脑血流量下降、右侧前庭神经核脑血流下降率升高（均P0.05），提示造模成功。干预后，与假手术组比较，模型组右侧前庭神经核脑血流量降低、右侧前庭神经核脑血流下降率升高、右侧脑干前庭神经核细胞凋亡率及Bax蛋白表达水平升高，Bcl-2、Mas、PKA-Ca、p-CREB/CREB蛋白表达水平降低（均P0.05）；与模型组相比，电针组和尼莫地平组大鼠右侧前庭神经核脑血流量升高、右侧前庭神经核脑血流下降率降低、跳台躲避时间缩短、右侧脑干前庭神经核细胞凋亡率及Bax蛋白表达水平降低，Bcl-2、Mas、PKA-Ca、p-CREB/CREB蛋白表达水平升高（均P0.05）；与尼莫地平组相比较，电针组大鼠右侧前庭神经核脑血流量升高、右侧前庭神经核脑血流下降率降低、跳台躲避时间缩短、右侧脑干前庭神经核细胞凋亡率及Bax蛋白表达水平降低，Bcl-2、Mas、PKA-Ca、p-CREB/CREB蛋白表达水平升高（均P0.05）。结论 颈椎横突尖针刺法能够有效抑制PCIV大鼠前庭神经核的细胞凋亡，其机制可能与改善前庭神经核脑血流量、激活Mas/PKA/CREB信号通路后调控相关蛋白抑制前庭神经核细胞的凋亡相关。