核定位人源α-突触核蛋白转基因小鼠的建立

作     者：韦梦晨 范胜涛 吴海婷 张艺薇 王子鸥 黄璋琼 WEI Mengchen;FAN Shengtao;WU Haiting;ZHANG Yiwei;WANG Ziou;HUANG Zhangqiong

作者机构：北京协和医学院中国医学科学院医学生物学研究所昆明650118 

出 版 物：《中国实验动物学报》 (Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica)

年 卷 期：2024年第32卷第3期

页      面：307-316页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071002[理学-动物学] 

基　　金：云南省技术创新人才培养对象项目(202105AD160018,202005AD160006) 中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目(2021-I2M-1-043) 国家自然科学基金联合基金项目(U2202214) 科技创新2030-重大专项(2023ZD0406306) 

主　　题：人源α-突触核蛋白 小鼠 核定位 转基因 运动功能障碍 

摘      要：目的 建立一种核定位人源α-突触核蛋白(α-synuclein, α-syn)转基因小鼠,并探究人源α-syn核输入对小鼠行为的影响。方法 构建hSNCA-NLS和EGFP的慢病毒载体,利用显微注射法建立转基因小鼠模型,通过PCR和Western Blot方法鉴定转基因首建鼠及其子代基因型和蛋白表达情况。采用免疫荧光鉴定人源α-syn在小鼠脑组织中的共定位情况,同时采用旷场、转棒、O迷宫实验评价转基因小鼠的行为改变情况。结果 hSNCA-NLS基因成功插入小鼠基因组中,人源α-syn成功表达,并且有明显的核定位现象。进一步研究发现,核定位人源α-syn转基因小鼠在2月龄时开始表现出了运动功能障碍,发生了星形胶质细胞增生和炎症反应,于9月龄时表现出了明显的焦虑样症状,γ-氨基丁酸(GABA)基因表达减少,这些表现一直持续到小鼠12月龄。结论 成功构建了核定位人源α-syn转基因小鼠,小鼠表现出明显的运动功能障碍和焦虑样症状。该模型的成功建立可以为研究α-syn核定位现象在帕金森病中的作用提供一定的研究基础。