黄色瘤胃球菌木聚糖酶基因xynB的异源表达与酶学性质研究

作     者：毕海红 胡馨元 王玉洁 翟圣君 张竞月 孙丽萍 王琴 夏呈强 BI Haihong;HU Xinyuan;WANG Yujie;ZHAI Shengjun;ZHANG Jingyue;SUN Liping;WANG Qin;XIA Chengqiang

作者机构：山西农业大学动物科学学院山西太谷030801 

出 版 物：《现代畜牧科技》 (Modern Animal Husbandry Science & Technology)

年 卷 期：2024年第2期

页      面：1-5页

学科分类：090502[农学-动物营养与饲料科学] 0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

基　　金：国家自然科学基金青年项目(32002143) 国家重点研发计划专项子课题(2022YFD1300705) 山西省重点研发计划项目(202102140601019) 山西省优秀博士来晋工作奖励项目(SXYBKY2019024) 

主　　题：黄色瘤胃球菌 木聚糖酶 xynB 异源表达 酶学性质 

摘      要：该试验以黄色瘤胃球菌基因组为模板,通过PCR扩增获得目的基因xynB,将xynB与表达载体PET28a连接,获得重组载体PET28a-xynB。用IPTG对含有重组载体的大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,镍离子层析柱纯化后检测其酶学性质。生物信息学分析表明,XynB理论大小为47 kDa,预测等电点为4.49,不含信号肽,含有1个糖苷水解酶11家族结构域和1个碳水化合物结合结构域。酶学性质研究结果表明,该酶的最适pH值为5.0,最适反应温度为40℃,金属离子Mg^(2+)、Na^(+)、K^(+)和Ba^(2+)对木聚糖酶XynB有较好的激活效果。综上可知,黄色瘤胃球菌木聚糖酶XynB属于GH11家族,最适pH值为5.0,最适温度为40℃,酶比活力为62.94 U/mg。