大黄黄连泻心汤加味对肥胖2型糖尿病大鼠内脏脂肪线粒体自噬及棕色化影响

作     者：安冬 梁永林 高艳奎 闫丰喆 赵思晨 刘中唐 马成军 朱向东 

作者机构：宁夏医科大学 甘肃中医药大学 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2024年

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(82060914) 2023年甘肃省优秀博士生项目(23JRRA1218) 2022年甘肃中医药大学研究生创新基金(2022CX05) 2021年甘肃省高等学校产业支撑计划项目(2021CYZC-03) 

主　　题：2型糖尿病 大黄黄连泻心汤加味 内脏脂肪 线粒体自噬 棕色化 低氧诱导因子1α(HIF-1α)/腺病毒E1B19kD相互作用蛋白3(BNIP3)/微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)信号通路 

摘      要：目的：观察大黄黄连泻心汤加味对肥胖2型糖尿病(T2DM)模型ZDF大鼠内脏脂肪组织线粒体自噬及棕色化的影响。方法：将40只ZDF大鼠高脂饲料诱导为肥胖T2DM模型，随机分为模型组、二甲双胍组(0.18g·kg-1)、大黄黄连泻心汤加味高、中、低剂量组(2.16g·kg-1、1.08g·kg-1、0.54g·kg-1)，每组8只，另取8只ZDF(fa/+)大鼠作为正常组，灌胃体积均为10 mL·kg-1，模型组和正常组灌服等体积纯净水，1次/天，持续12 周。定期检测大鼠空腹血糖(FBG)；干预12周后检测大鼠体质量、附睾脂肪质量、血清中葡萄糖(GLU)、糖化血清蛋白(GSP)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平；采用苏木素-伊红(HE)染色观察附睾脂肪组织病理形态学改变；透射电镜(TEM)观察脂肪细胞线粒体自噬情况；实时荧光定量(Real-time PCR)检测附睾脂肪低氧诱导因子1α(HIF-1α)、腺病毒E1B19kD相互作用蛋白3(BNIP3)、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、泛素结合蛋白1(p62)、解偶联蛋白1(UCP1)、碘代甲状腺素2(Dio2)、PR结构域结合因子16(Prdm16)mRNA表达，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测附睾脂肪HIF-1α、BNIP3、LC3B、p62及UCP1蛋白表达。结果：与正常组比较，模型组大鼠附睾脂肪出现病理学改变；脂肪细胞线粒体固缩、自噬小体较多并发生线粒体自噬；大鼠体质量、附睾脂肪质量、FBG、GLU、GSP、TC、TG、LDL-C水平显著升高(P0.01)，HDL-C水平显著降低(P0.01)，附睾脂肪HIF-1α、BNIP3、LC3B mRNA及蛋白表达显著升高(P0.01)，p62、UCP1 mRNA及蛋白表达显著降低(P0.01)，Dio2、Prdm16 mRNA表达显著降低(P0.01)；与模型组比较，各干预组大鼠附睾脂肪组织病变不同程度减轻；二甲双胍组和大黄黄连泻心汤加味高剂量组大鼠脂肪细胞胞浆中线粒体形态结构完整，嵴清晰，基质均匀，胞浆中可见少量自噬溶酶体和自噬小体；二甲双胍组、大黄黄连泻心汤加味高、中剂量组大鼠体重及附睾脂肪质量均显著降低(P0.01)；各干预组大鼠附睾脂肪指数均降低(P0.05)；各干预组大鼠FBG均降低(P0.01)；二甲双胍组及高、中剂量组大鼠血清中GSP、GLU、TG、LDL水平均降低(P0.05、P0.01)；二甲双胍组和高剂量组大鼠血清TC水平显著降低(P0.01)，各干预组大鼠血清HDL水平均升高(P0.05、P0.01)；二甲双胍组和大黄黄连泻心汤加味高、中剂量组附睾脂肪HIF-1α、BNIP3、LC3B mRNA及蛋白表达显著降低、UCP1蛋白表达水平显著升高(P0.05、P0.01)；二甲双胍组和大黄黄连泻心汤加味高剂量组p62、Dio2、Prdm16 mRNA及p62蛋白表达显著升高(P0.05、P0.01)。结论：大黄黄连泻心汤加味可能通过HIF-1α/BNIP3/LC3B途径抑制内脏脂肪组织线粒体自噬，促进脂肪棕色化，改善肥胖T2DM糖脂代谢。