携川芎嗪导电水凝胶促进脊髓损伤后血管新生和神经保护的实验研究

作     者：邓博文 蒋昇源 刘港 李筱叶 白惠中 霍路遥 徐杰 徐林 穆晓红 DENG Bowen;JIANG Shengyuan;LIU Gang;LI Xiaoye;BAI Huizhong;HUO Luyao;XU Jie;XU Lin;MU Xiaohong

作者机构：北京中医药大学东直门医院骨科北京100700 金华市中医医院手足显微外科浙江金华321017 

出 版 物：《中国修复重建外科杂志》 (Chinese Journal of Reparative and Reconstructive Surgery)

年 卷 期：2024年第38卷第2期

页      面：189-197页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主　　题：脊髓损伤 川芎嗪 水凝胶 神经保护 血管新生 

摘      要：目的探索携川芎嗪导电水凝胶(简称“TGTP)修复脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的潜在机制。方法将72只雌性SD大鼠随机分为4组,假手术组(A组)、SCI组(B组)、SCI+导电水凝胶组(C组)和SCI+TGTP组(D组)。A组仅切除椎板,其余组构建切除2 mm长脊髓的全横断模型。通过BBB评分法和改良Rivlin-Tator斜板实验分别于术前及术后1、3、7、14、28 d评估大鼠后肢运动功能恢复情况。术后7、28 d动物取材,通过免疫荧光染色观察新生血管,采用Western blot评估血管生成素1(angiopoietin 1,Ang-1)、Tie-2蛋白表达;术后28 d采用Western blot进一步评估促血管新生相关蛋白PDGF-B、PDGF受体β(PDGF receptorβ,PDGFR-β)、VEGF-A、VEGF受体2(VEGF receptor 2,VEGFR-2)的表达情况。术后28 d,采用Masson染色评估损伤区域瘢痕增生,Nissl染色观察神经元存活,LFB染色检测髓鞘分布和再生情况,免疫荧光染色和Western blot评估神经丝蛋白200(neurofilament 200,NF200)的表达。结果各组大鼠术后3 d起后肢运动功能逐渐恢复,D组术后3~28 d BBB评分和斜坡角度显著高于B组,术后14、28 d显著高于C组(P0.05)。Masson染色示B~D组胶原容积分数显著高于A组,D组显著低于B、C组(P0.05);D组断端可见少量散在黑色导电颗粒,周围胶原纤维成分少于C组。Nissl和LFB染色示D组损伤区域脊髓组织神经元及髓鞘结构相对完整、连续,尼氏体数量和髓鞘阳性表达面积明显优于B、C组(P0.05)。NF200免疫荧光染色和Western blot检测示,D组损伤区域NF200蛋白相对表达量显著优于B、C组(P0.05)。CD31免疫荧光染色示D组术后28 d荧光强度优于B、C组,可见管状或线性新生血管影。Western blot检测示术后7 d和28 d D组Ang-1、Tie-2蛋白相对表达量高于B、C组,差异均有统计学意义(P0.05)。术后28 d D组PDGF-B、PDGFR-β蛋白相对表达量显著高于B、C组,B组显著高于C组,差异均有统计学意义(P0.05)。术后28 d D组VEGF-A和VEGFR-2蛋白相对表达量优于B、C组,与B组比较差异有统计学意义(P0.05),但与C组比较仅VEGF-A蛋白差异有统计学意义(P0.05);B、C组间比较仅VEGFR-2蛋白差异有统计学意义(P0.05)。结论TGTP可能增强损伤区域再血管化,同时发挥神经元保护作用,从而减轻脊髓组织结构损伤,促进大鼠SCI后神经功能恢复。