猪δ冠状病毒感染猪树突状细胞及对免疫因子分泌能力的影响
Effects of porcine deltacoronavirus on infection and secretion of immune factors in porcine dendritic cells作者机构:河南农业大学动物医学院河南郑州450002 河南省动物性食品安全重点实验室河南郑州450002
出 版 物:《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)
年 卷 期:2024年第44卷第2期
页 面:223-230页
学科分类:090603[农学-临床兽医学] 090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金:河南省杰出青年基金资助项目(202300410192) 河南省科技攻关基金资助项目(212102110363) 河南省高校科技创新人才支持计划基金资助项目(21HASTIT039)。
摘 要:以猪树突状细胞(porcine dendritic cells,pDCs)为模型,探究猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)是否能够对pDCs进行有效感染及对抗病毒细胞因子分泌的影响。采集猪外周抗凝血,分离获得猪外周血单核细胞,经白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)和集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)诱导培养获得未成熟树突状细胞,利用倒置显微镜和透射电镜观察其生物学形态,通过蛋白质免疫印迹和激光共聚焦试验检测病毒是否可以对pDCs进行感染,qRT-PCR检测抗病毒因子IFN-α和ISG56的表达。结果显示,成功分离培养得到具有典型树突状细胞形态的pDCs,将PDCoV接种至分离培养得到的pDCs中,PDCoV可以有效感染,可以在pDCs中进行复制并产生感染性的子代病毒颗粒,病毒滴度达到4.4 lgTCID50/0.1 mL。同时检测PDCoV感染pDCs时对抗病毒因子表达的影响,结果表明,在病毒感染pDCs后48 h产生了高水平的IFN-α和ISG56。本研究成功诱导培养得到pDCs,首次证实PDCoV可以在体外感染pDCs,并在细胞中进行有效地复制,pDCs在病毒感染后促进IFN-α、ISG56的分泌来发挥抗病毒免疫效应,为后续研究PDCoV的致病机制提供了新的思路。