miR-520f-3p靶向LAMA3对结直肠癌细胞增殖、迁移的影响

作     者：苏雪梅 钟平玉 孙银平 

作者机构：福建医科大学附属龙岩第一医院消化内科福建龙岩364000 

出 版 物：《中国老年学杂志》 (Chinese Journal of Gerontology)

年 卷 期：2024年第44卷第2期

页      面：475-480页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：福建医科大学启航基金(No.2020QH1331)。 

主　　题：miR-520f-3p 层黏连蛋白3 结直肠癌 细胞增殖 细胞迁移 

摘      要：目的探讨miR-520f-3p靶向层黏连蛋白(LAMA)3对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分别检测病理组织样本、正常结直肠细胞FHC及CRC细胞SW480、LOVO、HCT116、HT29中miR-520f-3p表达;Western印迹检测病理组织样本中LAMA3蛋白表达。将对数生长期的LOVO细胞分为对照组、inhibitor NC组、miR-520f-3p inhibitor组、mimics NC组、miR-520f-3p mimics组、miR-520f-3p mimics+pcDNA组、miR-520f-3p mimics+pcDNA-LAMA3组;qRT-PCR检测各组细胞中miR-520f-3p表达;CCK-8法检测各组细胞增殖;划痕实验检测各组细胞迁移;Western印迹检测各组细胞中LAMA3、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)-2蛋白表达;荧光素酶报告基因实验检测miR-520f-3p与LAMA3的靶向关系;采用裸鼠皮下注射上述LOVO细胞以构建裸鼠体内成瘤模型,分为对照组、inhibitor NC组、miR-520f-3p inhibitor组、mimics NC组、miR-520f-3p mimics组、miR-520f-3p mimics+pcDNA组、miR-520f-3p mimics+pcDNA-LAMA3组,注射3 w后处死裸鼠,称量肿瘤质量。结果miR-520f-3p在CRC组织和SW480、LOVO、HCT116、HT29细胞中低表达,且在LOVO细胞中表达量最低,差异有统计学意义(P0.05),OD450值(24、48 h)、划痕愈合率、LAMA3、PCNA、CyclinD1、MMP-2蛋白表达及裸鼠体内肿瘤质量显著升高(P0.05)。结论过表达miR-520f-3p通过下调LAMA3抑制CRC细胞增殖、迁移及裸鼠体内移植瘤的生长。