4种食源性致病菌多重PCR检测体系的建立及其在乳品检测中的应用

作     者：王珊 高辉明 王雁伟 周思思 庞艳荣 艾鹏飞 WANG Shan;GAO Huiming;WANG Yanwei;ZHOU Sisi;PANG Yanrong;AI Pengfei

作者机构：河北科技大学食品与生物学院石家庄050018 

出 版 物：《中国乳品工业》 (China Dairy Industry)

年 卷 期：2024年第52卷第1期

页      面：47-52页

学科分类：0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 08[工学] 083203[工学-农产品加工及贮藏工程] 

基　　金：河北省重点研发计划“奶业振兴重大技术创新专项”(19227137D) 河北省大中学生科技创新能力培育专项(22E50074D) 

主　　题：多重PCR 食源性致病菌 检测 

摘      要：食源性致病菌是通过食物进入人体引起食物中毒和诱发疾病的有害微生物,严重威胁着人类健康和环境安全,为了预防和控制食源性疾病的发生,有效对策之一是对食品中的病原微生物进行安全检测。本研究采用一种多重聚合酶链式反应法(multiplex polymerase chain reaction,MPCR)快速检测乳品中4种食源性致病菌,结果表明,选取单核细胞增生李斯特氏菌prfA基因、蜡样芽胞杆菌gyrB基因、鼠伤寒沙门氏菌invA基因、大肠埃希氏菌O157∶H7 stx2A基因的保守序列设计4对引物,在优化的PCR反应体系和退火温度58℃下,PCR扩增表现出良好的特异性,分别扩增出274、221、482、108 bp条带,无非特异性扩增,4种病原菌检出限达到10~100 CFU/mL;对17份人工染菌牛奶样品进行检测,检出结果与国标培养法完全一致。该研究结果为快速、高效、准确地检测出乳品中单核细胞增生李斯特氏菌、蜡样芽胞杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、大肠埃希氏菌O157∶H7提供了一种实用方法,也为其他食源性致病菌的快速检测提供了思路。