小鼠血清中杀O139霍乱弧菌抗体检测方法的初步建立

作     者：范锋锋 谭小梅 李燕婷 吴朝今 刘月萍 乔瑞洁 王浩 赵志强 谢贵林 

作者机构：兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃省疫苗工程技术研究中心甘肃兰州730046 中国生物技术股份有限公司北京100029 

出 版 物：《微生物学免疫学进展》 (Progress In Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2014年第42卷第6期

页      面：24-30页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

主　　题：霍乱 霍乱弧菌 O139 小鼠免疫血清 杀弧菌抗体 滴度 

摘      要：目的研究探索O139霍乱弧菌杀弧菌抗体的检测方法。方法用微孔板培养和琼脂平板克隆计数相结合的杀弧菌抗体检测方法,对实验菌株及稀释度、补体浓度等关键参数进行筛选;对50份小鼠免疫血清进行杀弧菌抗体滴度检测,并与O139群霍乱弧菌LPS Ig G抗体滴度进行相关分析;对该方法的特异性、线性和精密性进行了验证。结果筛选出最佳菌株为20100603菌株,最佳稀释度倍数为2 000倍,补体最佳稀释倍数为16倍。O139群霍乱弧菌小鼠免疫血清检测到较高的杀弧菌抗体滴度而PBS小鼠免疫血清未检测到杀弧菌抗体滴度。小鼠免疫血清杀弧菌抗体滴度与O139群霍乱弧菌LPS Ig G抗体滴度之间存在正相关关系。验证结果显示,在抑制剂浓度达到1.0～2.0 A600时,抑制率100%;线性回归方程为y=-1.093x＋5.058,其相关系数为-0.999,P〈0.05;方法批内CV值为15.72%,批间CV值为23.47%。结论初步建立了O139霍乱弧菌杀弧菌抗体的检测方法,该方法具有较高的特异性、线性和精密度。