空斑试验在微生物实验教学中的改进及应用

作     者：徐鸣阳 朱勋 谭泳谣 谭姹辉 陈剑煌 李美玉 XU Mingyang;ZHU Xun;TAN Yongyao;TAN Chahui;CHEN Jianhuang;LI Meiyu

作者机构：中山大学医学院基础与临床医学教学实验室广东深圳518107 中山大学中山医学院微生物学教研室广东广州510080 中山大学中山医学院基础医学实验教学中心广东广州510080 

出 版 物：《热带医学杂志》 (Journal of Tropical Medicine)

年 卷 期：2024年第24卷第1期

页      面：142-145,151页

学科分类：0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 07[理学] 071005[理学-微生物学] 10[医学] 

主　　题：空斑试验 Vero细胞 寨卡病毒 登革病毒 实验教学 

摘      要：目的通过更换侵染病毒来改进制作“空斑试验示教板,以得到更鲜明的“空斑试验结果,使其更好地服务本科实验教学。方法用不同滴度的寨卡病毒和登革病毒感染培养于12孔细胞培养板的Vero细胞,置37℃吸附2 h。吸附后,用1%甲基纤维素Eagle氏覆盖液进行覆盖步骤,置细胞于37℃培养6~7 d将细胞固定和染色后,用自来水冲洗,待干。结果感染寨卡病毒的未死亡脱落的Vero细胞被结晶紫染色,紫色背景明显。肉眼可看到寨卡病毒感染细胞产生的无色空斑,空斑呈圆形,清晰完整,边缘整齐。空斑数量随着病毒浓度的升高而增加,复孔产生空斑数量趋势一致。感染登革病毒的未脱落Vero细胞被染成紫色,形成较鲜明的紫色背景,登革病毒感染细胞产生了无色空斑,但是空斑的形成数量较少,且不是所有复孔都产生了空斑。随着病毒稀释倍数增加,产生的空斑数量无明显减少趋势。结论用寨卡病毒感染Vero细胞能得到更典型的空斑试验结果,该方法更适用于本科教学制作示教结果用。