shRNA抑制SGK1基因表达对人乳腺癌细胞系生物学特性的影响

作     者：覃红斌 张玲 魏蕾 张京伟 QIN Hong-bin;ZHANG Ling;WEI Lei;ZHANG Jing-wei

作者机构：湖北民族学院医学院组织学胚胎学教研室湖北恩施445000 武汉大学基础医学院病理学教研室武汉430071 武汉大学中南医院肿瘤科 

出 版 物：《解剖学报》 (Acta Anatomica Sinica)

年 卷 期：2012年第43卷第2期

页      面：220-224页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：湖北省自然科学基金资助项目(2008CDB222) 

主　　题：乳腺癌 血清和糖皮质激素调节蛋白激酶 β—catenin RNA干扰 免疫印迹法 

摘      要：目的建立稳定抑制血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)表达的人乳腺癌细胞系MDA-MB-231,观察SGK1基因沉默对人乳腺癌细胞生物学特性的影响。方法构建针对SGK1的shRNA干扰质粒pGen-3-siSGK1和阴性对照质粒pGen-3-control。转染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231,经G418筛选得到稳定抑制SGK1表达的乳腺癌细胞模型;实时定量PCR、免疫荧光以及Western blotting检测shRNA干扰组、阴性对照组及未转染组细胞中SGK1的表达;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞体外生长能力;体外浸润实验、细胞迁移实验检测各组癌细胞的侵袭和转移。结果成功构建针对SGK1基因的shRNA干扰质粒,建立了稳定抑制SGK1表达的乳腺癌细胞模型;与阴性对照组和未转染组相比,肿瘤细胞中SGK1的表达水平显著降低(P0.01);SGK1基因沉默后,人乳腺癌细胞的生长能力、浸润和迁移能力均明显降低(P0.05)。实验中还发现抑制SGK1基因表达之后,β-catenin的含量也出现明显下降。结论抑制SGK1基因的表达可以显著抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长,并降低其侵袭转移的能力,其中β-catenin参与了SGK1基因的抑制功能。