氧化低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞增殖及circRNA-CER表达的影响

作     者：陈万 王小静 刘晗 赵郑波 CHEN Wan;WANG Xiaojing;LIU Han;ZHAO Zhengbo

作者机构：重庆市九龙坡区人民医院心内科重庆400050 重庆市九龙坡区人民医院神经内科重庆400050 重庆市渝北区中医院心内科重庆401121 

出 版 物：《贵州医科大学学报》 (Journal of Guizhou Medical University)

年 卷 期：2024年第49卷第1期

页      面：90-95页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：重庆市自然科学基金面上项目(cstc2020jcyj-msxmX0919) 

主　　题：环状RNA 微小RNA 动脉粥样硬化 人脐静脉内皮细胞 氧化低密度脂蛋白 

摘      要：目的探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC)后环状RNA circRNA-CER(circRNA-100876)的表达及其对HUVEC增殖的影响。方法分别以不同浓度ox-LDL(40、60、80、100及200 mg/L)刺激HUVEC 24 h,以及以100 mg/L ox-LDL刺激HUVEC 6、12、24及48 h,利用实时荧光定量PCR验证circRNA-CER在细胞中的表达水平;构建circRNA-CER特异性过表达质粒并进行细胞转染,采用CCK8实验研究circRNA-CER在血管内皮细胞增殖中的作用;荧光定量PCR检测circRNA-CER对miR-136表达的影响;Western blot检测过表达circRNA-CER后血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达水平,荧光素酶报告基因验证circRNA-CER与miR-136、miR-136与VEGF-3′UTR的相互作用。结果随ox-LDL处理浓度增加,circRNA-CER在HUVEC中的表达量呈下调趋势,并在100 mg/L时差异有统计学意义(P0.05);在用该浓度ox-LDL以时间梯度刺激HUVEC后,circRNA-CER表达随刺激时间的延长而下调,在24 h处差异有统计学意义(P0.05);上调circRNA-CER表达可抑制ox-LDL(100 mg/L、24 h)对HUVEC增殖的抑制作用,上调miR-136的RNA及VEGF的蛋白表达水平,同时干预miR-136表达可阻止circRNA-CER对VEGF表达的调控;荧光素酶报告基因实验证实circRNA-CER与miR-136、miR-136可与VEGF 3′-UTR直接结合。结论circRNA-CER可阻止ox-LDL对HUVEC增殖的抑制效应,机制为circRNA-CER通过“海绵样作用调控miR-136后,影响其对下游靶基因VEGF的转录后调控。