西沙海绵共附生放线菌ITBB-ZK-a5的分离鉴定及抗菌活性研究

作     者：齐敏 郭志凯 熊子君 张世清 吴炜城 李吉涛 QI Min;GUO Zhikai;XIONG Zijun;ZHANG Shiqing;WU Weicheng;LI Jitao

作者机构：生物资源保护与利用重点实验室(湖北民族大学)湖北恩施445000 海南省热带微生物资源重点实验室/中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南海口571101 海南省热带农业生物资源保护与利用重点实验室/中国热带农业科学院海南热带农业资源研究院海南海口571101 

出 版 物：《热带作物学报》 (Chinese Journal of Tropical Crops)

年 卷 期：2023年第44卷第12期

页      面：2569-2578页

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 

基　　金：海南省自然科学基金项目(No.322QN387) 生物资源保护与利用湖北省重点实验室开放基金项目(No.PKLHB1920) 海南省基础与应用基础研究计划(自然科学领域)高层次人才项目(No.2019RC306)。 

主　　题：海绵 海洋放线菌 抗植物病原真菌 抑菌活性 生防菌株 

摘      要：海洋放线菌因其所处环境特殊,在生理性状和遗传背景方面均具有独特的性质,因此海洋放线菌具有产生特殊代谢产物的巨大潜力。本研究以西沙海绵为研究对象,挖掘其具有抑菌活性的共附生放线菌资源。首先,利用平板分离法从海绵样品中分离纯化出一株活性放线菌菌株ITBB-ZK-a5,对其进行16S rRNA基因测序,结合构建的系统发育树和菌落形态特征,确定该菌株为链霉菌。其次,采用平板对峙法研究菌株ITBB-ZK-a5对植物病原真菌的抑菌广谱性和持效性。结果表明:该菌株对供试的16株病原真菌均有较好的抑菌活性,抑菌谱较广,且对峙14、30 d仍具有活性,抑菌持效性较好;为了进一步验证该菌株平板通过产生活性物质抑制病原菌生长,对菌落边缘的无菌琼脂块进行抑菌活性研究,结果表明抑菌率与菌落距离呈负相关,说明放线菌可能通过向平板中分泌活性物质以抑制病原菌的生长。该菌株连续转接5代后,仍具有较好的世代稳定性。再次,利用大米固体培养基对菌株ITBB-ZK-a5进行发酵,乙酸乙酯萃取浓缩得到提取物,通过滤纸片法对发酵粗提物进行光稳定性和热稳定性研究,结果表明,随着水浴温度升高和紫外照射时间的增加,菌株ITBB-ZK-a5对香蕉炭疽病病原菌的抑制效果呈下降趋势,但仍具有较强的抑菌活性。最后,测定菌株ITBB-ZK-a5对香蕉炭疽病病原菌的半最大效应浓度(EC_(50))为38.88μg/mL,对木瓜炭疽病病原菌的EC_(50)值为11.70μg/mL。本研究对南海海绵共附生放线菌进行了分离鉴定,筛选出具有抑制多种热带作物病原真菌活性的生防菌株ITBB-ZK-a5,并对其进行抑菌活性研究,为后续生防菌株的开发利用奠定基础。