miR-7靶向调控KLF4对结肠癌干细胞生物学行为的影响

作     者：常云丽 胥明 陈国裕 汤杰 陈玲玲 季洁如 CHANG Yunli;XU Ming;CHEN Guoyu;TANG Jie;CHEN Lingling;JI Jieru

作者机构：上海市浦东新区人民医院消化内科上海201299 

出 版 物：《山东医药》 (Shandong Medical Journal)

年 卷 期：2024年第64卷第1期

页      面：11-15页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：上海市浦东新区科技发展基金事业单位民生科研专项(医疗卫生)项目(PKJ2021-Y24) 

主　　题：结肠癌 微小核糖核酸7 Krüppe样因子4 

摘      要：目的探讨微小核糖核酸7(miR-7)靶向调控Krüppe样因子4(KLF4)对结肠癌干细胞生物学行为的影响。方法体外传代培养结肠癌干细胞。取传15代、对数生长期、生长状态良好的结肠癌干细胞,随机分为对照组、NC mimics组、miR-7 mimics组,NC mimics组和miR-7 mimics组分别转染空载质粒、miR-7 mimics质粒,对照组不予转染。采用RT-qPCR法验证转染效率。收集各组转染48 h结肠癌干细胞,采用CCK-8法检测细胞活力,采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力,采用改良Boyden小室法检测细胞侵袭能力,采用流式细胞术检测细胞凋亡率。通过TargetScan在线网站预测miR-7与KLF4的结合位点,并通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-7对KLF4的靶向调控作用。收集各组转染48 h结肠癌干细胞,分别采用RT-qPCR法、Western blotting法检测KLF4 mRNA和蛋白表达。结果miR-7 mimics组miR-7相对表达量高于对照组和NC mimics组(P均0.05)。miR-7 mimics组细胞存活率、细胞迁移率、穿膜细胞数均低于NC mimics组和对照组,细胞凋亡率高于NC mimics组和对照组(P均0.05)。经TargetScan在线网站预测,KLF4基因的3′非翻译区存在miR-7的结合位点;经双荧光素酶报告基因实验验证,miR-7对KLF4存在靶向调控作用。miR-7 mimics组KLF4mRNA与蛋白相对表达量均低于NC mimics组和对照组(P均0.05)。结论miR-7可通过靶向下调KLF4表达而抑制结肠癌干细胞的增殖、侵袭、迁移并促进其凋亡。