内皮唾液酸蛋白在人增生性瘢痕中的表达及其对成纤维细胞表型的调控

作     者：张清怡 张丽霞 韩东晖 焦晓春 郑朝 郭凯 杨云舒 Zhang Qingyi;Zhang Lixia;Han Donghui;Jiao Xiaochun;Zheng Zhao;Guo Kai;Yang Yunshu

作者机构：空军军医大学第一附属医院全军烧伤中心烧伤与皮肤外科西安710032 空军军医大学基础医学院学员三大队西安710032 空军军医大学第一附属医院泌尿外科西安710032 

出 版 物：《中华烧伤与创面修复杂志》 (Chinese Journal of Burns And Wounds)

年 卷 期：2023年第39卷第12期

页      面：1168-1174页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100202[医学-儿科学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金青年科学基金项目(81501666,82302809) 陕西省重点研发计划(2022SF-399)。 

主　　题：瘢痕 成纤维细胞 细胞外基质 细胞转分化 内皮唾液酸蛋白 胶原合成 

摘      要：目的探讨内皮唾液酸蛋白即CD248在人增生性瘢痕(HS)中的表达及其对人HS成纤维细胞(HSF)表型的调控作用。方法采用实验研究方法。2023年3—5月,空军军医大学第一附属医院烧伤与皮肤外科收治3例HS患儿,其中女2例、男1例,年龄1岁10个月~2岁。取前述患儿术中切除的HS组织及行全厚皮移植术后剩余的全厚皮片即正常皮肤组织,进行后续实验。取前述2种组织,行苏木精-伊红染色后观察组织结构,行Masson染色后观察组织中胶原分布情况,行免疫组织化学染色后观测组织中CD248表达情况。取HS组织,采用组织块培养法提取原代HSF,取第3~5代HSF进行后续实验。将HSF按随机数字表法分为免疫球蛋白G78(IgG78)处理组与IgG对照组,分别用终物质的量浓度为200 nmol/L的人源性CD248单克隆抗体IgG78与人源性IgG对照抗体处理24 h,采用实时荧光定量反转录PCR法检测细胞中Ⅰ型胶原蛋白和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA表达,采用蛋白质印迹法检测细胞中Ⅰ型胶原蛋白和α-SMA的蛋白表达,采用免疫荧光法检测细胞中Ⅰ型胶原蛋白和α-SMA的定位和蛋白表达情况。各实验样本数均为3。对数据行配对样本t检验和独立样本t检验。结果相较于正常皮肤组织,HS组织中表皮与真皮层均明显增厚,真皮层中胶原大量蓄积且排布紊乱。HS组织中CD248表达量明显高于正常皮肤组织(t=5.29,P0.05)。处理24 h,IgG78处理组HSF中Ⅰ型胶原蛋白、α-SMA的mRNA表达量分别为0.39±0.05、0.56±0.09,分别明显低于IgG对照组的1.00±0.07、1.00±0.08(t值分别为11.87、6.49,P值均0.05);IgG78处理组HSF中Ⅰ型胶原蛋白、α-SMA的蛋白表达量分别为0.617±0.011、0.67±0.14,分别明显低于IgG对照组的1.259±0.052、1.23±0.16(t值分别为20.92、4.52,P值均0.05)。处理24 h,免疫荧光染色显示,Ⅰ型胶原蛋白、α-SMA主要定位在2组HSF的细胞质中,IgG78处理组HSF中Ⅰ型胶原蛋白、α-SMA的蛋白表达均较IgG对照组明显减少。结论CD248在人HS中表达显著增高,靶向阻断CD248能够显著抑制人HSF的胶原合成与向肌Fb的转分化。