基于CRISPR-Cas13a/Cas12a的快速灵敏地检测猴痘病毒及其共感染病毒的双靶标一步检测方法

作     者：王潇 饶巧 陆正荣 邓小宝 沈容 王瑞 董玮艺 杞仙花 靳珍 汤有志 杜丹 Xiao Wang;Qiao Rao;Zhengrong Lu;Xiaobao Deng;Rong Shen;Rui Wang;Weiyi Dong;Xianhua Qi;Zhen Jin;Youzhi Tang;Dan Du

作者机构：State Key Laboratory of Cellular Stress BiologyCacner Research CenterSchool of MedicineFaculty of Medicine and Life SciencesXiamen UniversityXiamen 361102China Department of StomatologySchool of MedicineXiamen UniversityXiamen 361102China Innovation Center for Cell Signaling NetworkXiamen UniversityXiamen 361102China Guangdong Provincial Key Laboratory of Veterinary Pharmaceutics Development and Safety EvaluationCollege of Veterinary MedicineSouth China Agricultural UniversityGuangzhou 510642China 

出 版 物：《Science Bulletin》 (科学通报（英文版）)

年 卷 期：2023年第68卷第24期

页      面：3142-3148,M0005页

核心收录：

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

基　　金：supported by the National Key R&D Program of China(2022YFA1304000) the National Natural Science Foundation of China(81972823) the Foundation for Innovative Research Groups of the National Natural Science Foundation of China(32121004) the Guangdong Special Support Program innovation team(2019BT02N054) the Open Research Fund of State Key Laboratory of Cellular Stress Biology,Xiamen University(SKLCSB2019KF013) the Fundamental Research Funds for the Central University(20720220003) 

主　　题：共感染 专业技术培训 疾病检测 传染病管理 现场诊断 检测极限 猴痘病毒 摩尔浓度 

摘      要：近期全球范围内的猴痘病毒(MPXV)爆发引发了与其他病原体的严重共感染,尤其在资源匮乏的地区,急需快速而精准的现场诊断方案.该研究基于CRISPR-Cas13a和Cas12a系统的反式切割特性,分别建立了单靶标的一步检测方法,并整合这两个系统建立了双重靶标检测系统.Cas13a和Cas12a的单靶标一步检测方法展现出高于标准定量PCR的阳性检测率,检测极限达到4拷贝,总检测时间不超过40min,而且无需复杂设备或专业技术培训.而基于Cas13a/Cas12a的双重靶标检测系统,可检测到低至阿摩尔浓度的靶标,总检测时间不超过45 min.这一双靶标一步检测方法可以用于多靶标鉴定MPXV,能够在单一样本中区分MPXV亚型,或鉴定MPXV与SARS-CoV-2或HIV病毒的共感染情况.经过临床模拟样本的检验,结果确认了这种方法的快速、准确、可靠、方便且高效的特性,凸显了其应用于现场检测方面的潜力,有助于改进疾病检测方法和传染病管理.