转基因玉米中植酸酶蛋白免疫亲和纯化体系的建立

作     者：赵倩倩 周晓今 柳小庆 杨文竹 李素贞 刘奇 陈茹梅 

作者机构：中国农业科学院生物技术研究所作物功能基因组与遗传改良中心北京100081 河北农业大学保定071001 北京奥创金标生物技术有限公司北京102600 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2013年第33卷第6期

页      面：125-130页

核心收录：

学科分类：08[工学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

主　　题：植酸酶蛋白纯化免疫亲和层析硫酸铵沉淀 离子交换层析 

摘      要：为深入研究转基因玉米所表达的植酸酶蛋白的酶学性质,评价重组蛋白的致敏性和饲用安全性,必须获得高纯度植酸酶蛋白。利用识别4个不同表位的单克隆抗体制备了植酸酶蛋白亲和层析体系。结果显示,通过80%硫酸铵沉淀植酸酶蛋白粗提液初步浓缩目的蛋白后,再经过透析去除高浓度盐离子,进而通过免疫亲和层析可获得在SDS-PAGE胶上条带单一的植酸酶蛋白,比活可达470.99 U/mg。同时,将上述免疫亲和层析法对植酸酶的纯化效果与离子交换层析方法进行了对比,结果表明免疫亲和层析法具有稳定、快速和纯化产物比活高等优势,所获得的目的蛋白满足各种检测要求,优于离子交换层析方法。