茯苓多糖对LPS诱导猫肾细胞炎症的保护作用研究

作     者：刘佳丽 林冰 刘欣 闫普普 夏瑾瑾 黄永熙 白若男 郭利伟 刘国平 LIU Jiali;LIN Bing;LIU Xin;YAN Pupu;XIA Jinjin;HUANG Yongxi;BAI Ruonan;GUO Liwei;LIU Guoping

作者机构：长江大学动物科学学院荆州434100 

出 版 物：《中国畜牧兽医》 (China Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2023年第50卷第11期

页      面：4747-4758页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：长江大学大学生创新训练项目(Yz2022068) 荆州市2022年度自然科学研究专项(202254-07CC) 石首市先行县“先进技术集成示范基地建设与定向攻关”揭榜项目(SS202311) 

主　　题：茯苓多糖 猫肾细胞 脂多糖 炎症 细胞凋亡 

摘      要：【目的】研究茯苓多糖(Poria cocos polysaccharide,PCP)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的猫肾细胞(crandell rees feline kidney,CRFK)炎症反应的保护作用及抗炎机制。【方法】通过MTT法检测不同浓度PCP(5、10、15、25、35、45μg/mL)和LPS(20、40、60、80、100、125、150μg/mL)对CRFK细胞活力的影响;用不同浓度PCP处理LPS诱导的CRFK炎症模型,观察PCP干预后的细胞形态变化,通过硝酸还原酶法和流式细胞术检测CRFK中一氧化氮(NO)释放和细胞凋亡情况;利用实时荧光定量PCR和Western blotting检测细胞炎症和凋亡相关基因以及蛋白表达水平。【结果】5~25μg/mL PCP对CRFK无毒性,且可逆转LPS刺激后CRFK细胞形态变化。25μg/mL PCP可显著降低LPS刺激后CRFK内NO释放和细胞凋亡率(P0.05)。实时荧光定量PCR结果表明,不同浓度PCP能够显著降低LPS诱导CRFK中IL-6、TNF-α、Caspase3、Caspase8、Caspase9、Bid和Bax mRNA表达量,显著上调Bcl-2 mRNA表达量(P0.05)。Western blotting结果显示,LPS诱导的CRFK中TLR4、NF-κB、Caspase3和Caspase9蛋白表达水平显著升高(P0.05),PCP处理能显著降低TLR4、NF-κB、Caspase3和Caspase9蛋白表达量(P0.05)。【结论】PCP能够通过调控细胞凋亡抑制LPS诱导的CRFK炎症损伤,其作用机制可能与抑制TLR4-NF-κB信号通路有关。研究结果为PCP治疗CRFK炎症提供了新的靶点和试验依据。