一种高活性γδT细胞的体外培养方案

作     者：林沁汝 梁卉彤 杨辛毅 杨金龙 朱豫琪 梁玥 李敏 成逸鹏 朱焕章 LIN Qinru;LIANG Huitong;YANG Xinyi;YANG Jinlong;ZHU Yuqi;LIANG Yue;LI Min;CHENG Yipeng;ZHU Huanzhang

作者机构：复旦大学生命科学学院上海200433 

出 版 物：《复旦学报（自然科学版）》 (Journal of Fudan University：Natural Science)

年 卷 期：2024年第63卷第3期

页      面：380-388页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

主　　题：γδT细胞 唑来膦酸 肿瘤免疫 

摘      要：γδT细胞的体外大规模扩增一般需较长周期,获取高纯度细胞时往往难以保持细胞活性。本文建立了一种无饲养细胞、无外源血清的优化的人γδT细胞体外培养方案。基于唑来膦酸(ZOL)和CD3激活剂从人外周血单个核细胞(PBMC)中扩增γδT细胞,在培养第6天得到纯度90%以上的γδT细胞。以CD62L和CD45RA为标记检测扩增产物的记忆分化表型,70%以上为naive T细胞和T记忆干细胞;检测CD69和CD25检测结果表明细胞处于早中期活化状态,PD-1、LAG-3和TIM-3检测结果表明细胞衰竭程度较低。将扩增产物与Jurkat细胞系共孵育,分别通过脱颗粒、IFN-γ分泌和肿瘤细胞杀伤率证实了扩增产物具备较高的Jurkat细胞毒性。使用慢病毒感染扩增产物,证实扩增产物可接受高效的基因转染。本研究提供了可用于过继性细胞移植的高活性γδT细胞,为肿瘤免疫疗法的深入研究及临床应用创造了新的可能。