当归苯酞riligustilide抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症反应及机制研究

作     者：刘员 王欢欢 吕洁丽 张来宾 

作者机构：新乡医学院药学院 

出 版 物：《中华中医药学刊》 (Chinese Archives of Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2023年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81773898) 河南省优秀青年科学基金项目(212300410066) 

主　　题：当归 苯酞二聚体 抗炎 RAW264.7细胞 作用机制 

摘      要：目的：研究当归苯酞二聚体riligustilide(DG2)对脂多糖(lipopolysaccharides，LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应的抑制作用，并探讨其作用机制。方法：通过LPS诱导建立RAW264.7细胞炎症模型，采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)法考察DG2对RAW264.7细胞存活率的影响，Griess法考察DG2对LPS诱导的RAW264.7细胞释放炎症介质一氧化氮(nitric oxide，NO)的影响，酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay， ELISA)考察DG2对LPS诱导的RAW264.7细胞分泌炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)的影响，Western blotting法考察DG2对LPS诱导的RAW264.7细胞诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)和环氧化酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)，以及丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)、核转录因子κB(nuclear factor-κB，NF-κB)和信号传导及转录激活蛋白(signal transducer and activator of transcription，STAT)信号通路的影响，免疫荧光法考察DG2对LPS诱导的RAW264.7细胞STAT3核转位的影响。结果：DG2浓度在64 μmol/L下对RAW264.7细胞存活率无影响，DG2能显著降低LPS诱导的RAW 264.7细胞释放NO的水平(P0.001)(IC50= 26.13 ± 5.75 μmol/L)，与阳性对照槲皮素的作用相当(IC50= 26.06 ± 2.28 μmol/L)；还能够显著抑制炎症因子IL-6和TNF-α的生成(P0.01，P0.001)。DG2能够显著抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞iNOS和COX-2蛋白的表达(P0.01，P0.001)，显著抑制p-STAT3、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)和p-p38的蛋白表达(P0.05，P0.01)，同时抑制STAT3的核转位。结论：DG2可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症反应，其机制可能与下调STAT、NF-κB和MAPK信号通路有关。