狄斯瓦螨唾液毒性蛋白VTP互作蛋白FABP的鉴定与功能分析

作     者：丁兆润 李家豪 陈晓文 李文峰 韩日畴 张祎 DING Zhao-Run;LI Jia-Hao;CHEN Xiao-Wen;LI Wen-Feng;HAN Ri-Chou;ZHANG Yi

作者机构：广东省科学院动物研究所广州510260 华南农业大学广州510642 华南师范大学广州510631 青海师范大学西宁810008 广东药科大学广州527527 

出 版 物：《应用昆虫学报》 (Chinese Journal of Applied Entomology)

年 卷 期：2023年第60卷第3期

页      面：755-763页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：2022年省级乡村振兴战略专项资金种业振兴项目(2022-440000-4301030211-9465)。 

主　　题：中华蜜蜂 狄斯瓦螨 VTP 脂肪酸结合蛋白 

摘      要：【目的】阐明狄斯瓦螨Varroa destructor唾液毒性蛋白(Varroa toxic protein,VTP)致死中华蜜蜂(以下简称中蜂)Apis cerana工蜂预蛹的机制,从而了解狄斯瓦螨与中蜂的互作机制,为开发蜂螨害防治新技术拓宽思路。【方法】通过酵母双杂交筛选狄斯瓦螨唾液蛋白VTP的互作蛋白;利用RNAi技术和qRT-PCR验证互作蛋白基因功能并检测相关基因表达情况。【结果】利用酵母双杂交筛选到11个候选蛋白基因,进一步通过“回复验证,脂肪酸结合蛋白(Fatty acid binding protein,FABP)是唯一阳性蛋白;为了进一步验证FABP在体内与VTP结合,通过注射dsRNA-fabp干扰中蜂幼虫fabp的表达,结果发现,注射dsRNA-fabp幼虫组化蛹率(58%)与仅注射VTP组(40%)相比显著提高。qRT-PCR检测发现,fabp沉默后,幼虫的蘑菇体大型凯恩细胞特异性蛋白1基因(Mushroombodylarge-typeKenyon cell-specificprotein1,mblk-1)基因和蜕皮激素受体基因(Ecdysonereceptor,ecr)基因的相对表达量发生变化。【结论】狄斯瓦螨唾液毒性蛋白VTP可能通过与中蜂体内FABP蛋白结合,导致5龄幼虫化蛹失败,从而致死中蜂。