重楼皂苷Ⅰ对紫外损伤的人永生化角质形成细胞(HaCaT)的保护作用研究

作     者：高梓琪 王冬雪 武思敏 黄业伟 满佳旭 高蕊蕊 张冬英 GAO Ziqi;WANG Dongxue;WU Simin;HUANG Yewei;MAN Jiaxu;GAO Ruirui;ZHANG Dongying

作者机构：云南农业大学理学院云南昆明650201 云南农业大学普洱茶学教育部重点实验室云南昆明650201 

出 版 物：《云南农业大学学报（自然科学版）》 (Journal of Yunnan Agricultural University:Natural Science)

年 卷 期：2023年第38卷第4期

页      面：621-626页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(31760226) 云南省重大科技项目(2018IA060) 

主　　题：重楼皂苷Ⅰ 紫外损伤 人永生化角质形成细胞 去乙酰化酶 

摘      要：【目的】研究重楼皂苷Ⅰ(polyphyllinⅠ,PPⅠ)对急性中波紫外线(medium wave ultraviolet rays,UVB)损伤的人永生化角质形成细胞(HaCaT)的保护作用及分子机制,为滇重楼在日化用品中的应用提供理论依据。【方法】采用四甲基偶氮唑蓝法检测不同浓度PPⅠ处理HaCaT的存活率,筛选出无毒性PPⅠ浓度;将HaCaT细胞随机分为4组:空白对照组、UVB处理组(21.6 mJ/cm^(2))、0.250μmol/L PPⅠ+UVB处理组和0.500μmol/L PPⅠ+UVB处理组,采用结晶紫染色法探究2种浓度PPⅠ对UVB处理后HaCaT细胞增殖的影响;采用蛋白质免疫印迹法检测HaCaT细胞凋亡蛋白多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP1)、cleaved-PARP1、乙酰基-赖氨酸、K68位点的线粒体超氧化物歧化酶重组蛋白(mitochondrial recombinant superoxide dismutase 2,K68-SOD2)和沉默调节3蛋白(sirtuin3,SIRT3)的表达。【结果】与空白对照组相比,UVB组的HaCaT细胞存活率显著下降,cleaved-PARP1和K68-SOD2表达显著增加,而SIRT3表达显著降低,造模成功。与UVB组相比,PPⅠ各剂量处理组可提高UVB照射后HaCaT细胞的存活率,增加SIRT3的表达,降低K68-SOD2的乙酰化水平,进而减少凋亡蛋白cleaved-PARP1的表达,降低细胞的凋亡水平。【结论】PPⅠ可能通过增强SIRT3活性使SOD2去乙酰化,以增强SOD2活性,减轻UVB照射HaCaT细胞引起的氧化应激和凋亡,从而对HaCaT细胞起到保护作用。