肉豆蔻木酚素调控L-谷氨酸诱导的神经元细胞凋亡的机制

作     者：楚新歌 孙周 邱新茹 李莎 崔春爱 CHU Xin-ge;SUN Zhou;QIU Xin-ru;LI Sha;CUI Chun-ai

作者机构：延边大学医学院解剖学教研室吉林延吉133000 

出 版 物：《中国临床药理学杂志》 (The Chinese Journal of Clinical Pharmacology)

年 卷 期：2023年第39卷第13期

页      面：1870-1874页

核心收录：

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(82060746 81660687)。 

主　　题：肉豆蔻木酚素 FoxO3a/p27通路 神经元 细胞凋亡 

摘      要：目的 探讨L-谷氨酸对海马神经元毒性损伤及肉豆蔻木酚素的干预作用。方法 选用鼠性海马神经元HT22细胞,用2.5 mmol·L^(-1)L-谷氨酸制备氧化应激细胞模型,以不同浓度肉豆蔻木酚素进行干预。将细胞分为5组:正常组、模型组(2.5 mmol·L^(-1)谷氨基酸处理)和低(2.5μmol·L^(-1)肉豆蔻木酚素处理)、中(5μmol·L^(-1)肉豆蔻木酚素处理)、高(10μmol·L^(-1)肉豆蔻木酚素处理)3个浓度实验组。用噻唑蓝(MTT)法检测神经元生存率;用WST-8法检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活性;用原位末端标记(TUNEL)法染色技术观察细胞凋亡情况;用免疫荧光染色技术检测叉头框蛋白O3a(FoxO3a)、核因子κB(NF-κB)和细胞周期蛋白p27^(kip1)(p27^(Kip1))、细胞周期素D1(CyclinD1)的定位及表达;用蛋白质印迹法检测各组磷酸化叉头框蛋白O3a(p-FoxO3a)、磷酸化NF-κB (p-NF-κB)、p27^(Kip1)、CyclinD1表达。结果 24 h后,正常组、模型组和低、中、高3个浓度实验组的生存率分别为100%、(48.96±5.00)%、(65.59±3.72)%、(72.14±2.04)%、(87.76±0.69)%,模型组与正常组比较,差异有统计学意义(P0.01);低、中、高浓度实验组与模型组比较,差异有统计学意义(均P0.05)。模型组和低、中、高3个浓度实验组SOD活性分别为(0.46±0.04)、(0.77±0.03)、(0.87±0.03)和(1.10±0.11)U·mg^(-1),MDA含量分别为(55.11±1.23)、(44.77±1.07)、(41.44±1.69)和(30.38±1.96)nmol·mg^(-1),低、中、高3个浓度实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P0.05)。苏木精-伊红(HE)和TUNEL染色显示,低、中、高3个浓度实验组谷氨基酸所诱导的氧化损伤和海马神经元凋亡;肉豆蔻木酚素通过抑制FoxO3a阳性颗粒的细胞浆内转位和NF-κB的核转位,抑制了p27^(Kip1)和CyclinD1表达。结论 肉豆蔻木酚素通过FoxO3a/p27^(Kip1)通路调控谷氨酸所诱导的海马神经元凋亡,具有明显的神经保护作用。