Spondin-2基因沉默对人结直肠癌SW480细胞的侵袭及上皮-间充质转化能力的影响

作     者：周全博 徐纪中 袁维堂 Zhou Quanbo;Xu Jizhong;Yuan Weitang

作者机构：郑州大学第一附属医院结直肠肛门外科郑州450052 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2023年第40卷第7期

页      面：1322-1325页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(U2004112)。 

主　　题：Spondin-2 基因沉默 结直肠癌 SW480 侵袭 上皮-间充质转化 

摘      要：目的探讨Spondin-2(SPON2)基因沉默对人结直肠癌SW480细胞侵袭及上皮-间充质转化(EMT)能力的影响。方法体外培养人结直肠癌SW480细胞, 对细胞进行慢病毒转染, 并将细胞分为对照组、阴性转染组和shSPON2转染组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测各组细胞中Spondin-2 mRNA的表达;细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测培养24、48、72 h后各组细胞增殖情况, Transwell法检测培养48 h后各组细胞侵袭情况;蛋白免疫印迹法检测培养48 h后各组细胞中蛋白细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、pERK1/2、含ETS域蛋白1(ELK-1)、pELK-1及EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达。研究数据采用单因素方差分析进行比较。结果 shSPON2转染组SPON2 mRNA表达水平(0.43±0.04)低于对照组(1.00±0.05, t=21.805, P0.05), 低于阴性转染组(0.97±0.03, t=26.454, P0.05)。培养24、48、72 h后, 3组间同一时间吸光度(A)值比较, 差异有统计学意义(F=27.982、31.052、28.484, P0.05)。同一时间下, 与对照组比较, shSPON2转染组细胞A值降低, 且低于阴性转染组(P0.05)。shSPON2转染组SW480细胞侵袭数目[(55.93±11.24)个]低于对照组[(118.75±19.61)个, t=6.808, P0.05], 低于阴性转染组[(105.87±15.36)个, t=6.427, P0.05]。3组间SW480细胞蛋白pERK1/2、pELK-1表达水平比较, 差异有统计学意义(F=357.899、339.313, P0.05)。与对照组比较, shSPON2转染组细胞蛋白pERK1/2、pELK-1表达降低, 且低于阴性转染组(P0.05)。3组间E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平比较, 差异有统计学意义(F=316.867、533.522、416.446, P0.05)。与对照组比较, shSPON2转染组细胞蛋白E-cadherin表达升高, N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低(P0.05)。结论 SPON2基因沉默能够抑制SW480细胞增殖、侵袭, 抑制EMT过程, 可能与ERK/ELK-1信号通路的抑制有关。