石斛酚抑制黑色素瘤细胞增殖与迁移的作用以及潜在靶点miRNA的分析

作     者：向志宇 阿卜杜米吉提·艾海提 韩雪 戴小华 史慧君 姚刚 XIANG Zhi-yu;ABUDUMIJIT·Ahat;HAN Xue;DAI Xiao-hua;SHI Hui-jun;YAO Gang

作者机构：新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052 

出 版 物：《沈阳农业大学学报》 (Journal of Shenyang Agricultural University)

年 卷 期：2023年第54卷第4期

页      面：422-429页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：新疆维吾尔自治区自然科学基金(青年基金)项目(2019D01B24) 新疆农业大学校前期资助项目(XJAU201707) 

主　　题：黑色素瘤 石斛酚 miRNA表达谱 

摘      要：探究石斛酚对黑色素瘤细胞生物学功能的调节作用及其对miRNA表达谱的影响。用不同浓度(0,40,80,160,320μmol·L^(-1))石斛酚处理小鼠黑色素瘤B16细胞,采用CCK-8法检测B16细胞增殖能力,采用细胞划痕实验检测B16细胞迁移能力。利用Small RNA-seq技术检测Control组和石斛酚组(160μmol·L^(-1))细胞中的miRNA的表达情况,构建其差异表达谱,并对差异表达miRNA进行生物信息学分析,确定差异表达miRNA的主要生物学功能及其可能参与的信号通路。结果表明:石斛酚对黑色素瘤B16细胞的增殖与迁移能力均有抑制作用,且具有剂量依赖性,160μmol·L^(-1)和320μmol·L^(-1)石斛酚处理的增殖抑制率分别为51.19%和70.51%,迁移率分别为(21.82±6.27)%和(8.54±5.02)%。Small RNA-seq数据分析结果显示,与Control组相比,石斛酚组显著上调表达42个miRNA和显著下调表达11个miRNA,这53个差异表达miRNA共预测到2 050个靶基因,通过GO分析发现靶基因功能主要是参与轴突导向、细胞质、DNA结合等,KEGG分析发现靶基因主要与Rap1信号通路、钙信号通路、吗啡成瘾以及磷脂酶D信号通路等信号转导通路关系密切。除33个新预测到的miRNA外,其余差异表达miRNA共20个,即与Control组相比,石斛酚组中显著上调的miRNA有mmu-miR-132-5p、mmu-miR-144-3p、mmu-miR-212-3p、mmu-miR-5100、mmu-miR-6238、mmu-miR-6239、mmu-miR-6240、mmu-miR-690、mmu-miR-6937-5p、mmu-miR-708-5p和mmu-miR-708-3p;显著下调的miRNA有mmu-miR-1191b-5p、mmu-miR-133a-3p、mmu-miR-3073a-5p、mmu-miR-3091-3p、mmu-miR-335-3p、mmu-miR-5128、mmu-miR-6539、mmu-miR-7661-3p和mmu-miR-7667-5p。可见,石斛酚可能通过调控黑色瘤细胞中miRNA的表达,影响相关细胞生物学功能而发挥抑制黑色瘤发生发展的作用。