转cry1Ab-vip3Af 2和cp4-epsps基因的抗虫耐除草剂水稻的研究

作     者：张思雨 林朝阳 叶雨轩 沈志成 ZHANG Siyu;LIN Chaoyang;YE Yuxuan;SHEN Zhicheng

作者机构：浙江大学昆虫科学研究所浙江杭州310058 浙江大学新农村发展研究院浙江杭州310058 

出 版 物：《浙江农业学报》 (Acta Agriculturae Zhejiangensis)

年 卷 期：2023年第35卷第8期

页      面：1823-1833页

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 090401[农学-植物病理学] 

基　　金：农业农村部转基因重大专项(2016ZX08010-003)。 

主　　题：转基因 害虫防治 抗虫水稻 耐除草剂水稻 

摘      要：为培育抗虫耐除草剂转基因水稻(Oryza sativa L.),本研究将抗虫融合基因cry1Ab-vip3Af 2与耐草甘膦基因cp4-epsps构建在同一T-DNA中,并利用农杆菌侵染法导入秀水134水稻。对获得的转化体的分子特征及抗虫耐除草剂性能进行分析研究,从众多转化体中筛选得到优良转化体VB3。High efficiency TAIL-PCR(Hi-Tail PCR)的分析结果表明,VB3转化体中外源T-DNA的插入位点未编码已知或预测的功能基因。DNA杂交印迹结果显示,VB3转化体的外源T-DNA以单拷贝的形式整合在水稻基因组中。酶联免疫吸附反应和蛋白质免疫印迹分析结果表明,T_(1)、T_(2)代VB3转化体的不同组织中均检测到较高的外源蛋白表达量,且不同世代之间表达量无明显差异。室内生测结果显示,VB3转化体对大螟(Sesamia inferens)、二化螟(Chilo suppressalis)和稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis)均表现出较高的抗性。三种靶标昆虫的幼虫取食VB3植物组织后,48 h的死亡率达到90%左右,72 h内全部死亡。草甘膦耐受性能测定结果表明,VB3转化体能够耐受20、40和80 mL·hm^(-2)的草甘膦。综上所述,本研究筛选出的VB3转化体具有较好的生产应用前景。