伪狂犬病毒在小鼠原代神经细胞中潜伏感染模型的建立

作     者：向广韬 吴红霞 王异民 周末 王亚林 王翌 尹航 仇华吉 孙元 

作者机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2023年

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家重点研发计划项目“猪伪狂犬病毒潜伏感染及其致病机制”（2016YFD0500105） 国家自然科学基金面上项目“伪狂犬病病毒变异株神经毒力增强的分子机制”（31570149） 

主　　题：伪狂犬病毒 小鼠背根神经节 潜伏感染 再激活 模型 

摘      要：由于缺少良好的潜伏感染模型，人们对PRV潜伏感染机制知之甚少。本研究旨在为研究PRV的潜伏感染建立体外细胞模型。通过分离新生鼠背根神经节（DRG）获取神经细胞，并用间接免疫荧光（IFA）的方法对其进行鉴定，获得了DRG中的神经细胞。用报告重组病毒（rPRV-EGFP）感染此神经细胞，同时添加阿昔洛韦（ACV）抑制病毒复制以建立潜伏感染。并对影响潜伏感染的条件，病毒接种剂量和ACV的浓度进行优化。结果显示，感染复数（MOI）为0.001,ACV浓度为0.5 mmol/L，病毒能够在神经细胞上稳定地建立潜伏感染。用荧光定量RT-PCR、测定病毒滴度、药物刺激再激活的方法对潜伏感染进行了鉴定。结果显示，潜伏感染时病毒不能复制，且不产生感染性病毒粒子；而经LY294002(PI3K抑制剂)诱导病毒再激活后，病毒大量复制并产生感染性病毒粒子。本研究利用小鼠原代神经细胞建立了PRV的潜伏感染模型，该模型的建立为PRV潜伏感染机制的研究奠定了基础。