香菇菌C91-3凋亡相关蛋白24414对小鼠肝癌细胞Hca生物学功能的影响

作     者：刘奔 钟民涛 王晓丽 孙文长 宁安红 李星云 刘磊 黄敏 LIU Ben;ZHONG Min-tao;WANG Xiao-li;SUN Wen-chang;NING An-hong;LI Xing-yun;LIU Lei;HUANG Min

作者机构：大连医科大学微生物学教研室辽宁大连116044 

出 版 物：《大连医科大学学报》 (Journal of Dalian Medical University)

年 卷 期：2012年第34卷第1期

页      面：30-35页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主　　题：香菇菌 毕赤酵母 蛋白 功能 凋亡 

摘      要：[目的]通过诱导表达香菇菌C91-3凋亡相关蛋白24414,研究其对小鼠肝癌细胞Hca的生物学功能影响,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的机制。[方法]构建真核重组表达质粒pPIC9K-24414,用毕赤酵母GS115体系进行诱导表达,将已鉴定的诱导表达蛋白作用于小鼠肝癌细胞Hca,用MTT法测定不同浓度目的蛋白组、顺铂(DDP)组及空白对照组的抑瘤率,用流式细胞术检测目的蛋白对肿瘤细胞的凋亡作用,同时用MTT法检测目的蛋白对正常鸡胚成纤维细胞的毒性作用。[结果]Western-blot结果显示目的蛋白成功表达;MTT法检测结果显示,不同浓度此蛋白对Hca细胞的生长抑制作用(OD595)与对照组比较差异均有显著性意义(P0.05),7.5μg/mL、15μg/mL和30μg/mL目的蛋白的最大抑瘤率分别为70.03%、82.02%和74.66%,均超过5μg/mL DDP的作用;流式细胞术结果显示,此蛋白具有诱导Hca细胞凋亡的能力,早晚双期细胞凋亡诱导率与对照组比较差异均有显著性意义(P0.05),浓度为30μg/mL时诱导凋亡的作用最强,早晚两期凋亡率分别为(9.28±0.04)%和(9.37±0.03)%;同时此蛋白对正常细胞无毒性作用。[结论]香菇菌C91-3凋亡相关蛋白24414在毕赤酵母GS115中成功诱导表达,此蛋白对小鼠肝癌细胞Hca生长具有抑制作用,能够诱导其产生凋亡,为进一步深入研究香菇菌C91-3的抗肿瘤机制奠定了基础。