互补引物/模板评价毕加酵母表达的丙型肝炎病毒RNA依赖的RNA聚合酶
Evaluation on Hepatitis C Virus RNA Dependent RNA Polymerase Expressed in Pichia pastoris using a Symmetrical Primer-Template Substrate作者机构:北京大学人民医院北京大学肝病研究所北京100044 徐州医学院附属医院
出 版 物:《病毒学报》 (Chinese Journal of Virology)
年 卷 期:2002年第18卷第1期
页 面:29-33页
核心收录:
学科分类:1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学]
基 金:教育部留学回国人员科研启动基金 (教外司留 [2 0 0 0 ]36 7号 ) 首都二四八工程重大创新工程 (生物医药领域 )资助项目( 95 5 0 2 12 70 0 ) 国家自然科学基金 ( 30 170 844)
主 题:丙型肝炎病毒 RNA依赖 RNA聚合酶 互补引物/模板 评价 表达
摘 要:构建含有感染性克隆HCV非结构基因 5b区序列的酵母表达质粒 ,转化毕加酵母 ,获得持续、可溶性HCVRNA依赖的RNA聚合酶 (RdRp)的表达 ,纯化蛋白在SDS -PAGE及Westernblot中显示出特异性的 6 4 2kDHCVRdRp蛋白带 ,同聚引物 /模板测定显示RdRp的活性极低 ,延长反应时间 ,RNA聚合活性仅轻度升高。采用合成的杂聚互补引物 /模板 ,未发现核苷酸在毕加酵母表达的RdRp作用下掺入模板 ,随时间延长 ,杂聚互补引物 /模板降解。