构建cRNA作为标准曲线的实时RT-PCR检测方法
A method of constructing cRNA standard curves for quantitative real-time reverse transcription polymerase chain reaction作者机构:第二军医大学附属长海医院中心实验室上海200433 第二军医大学附属长海医院普外科上海200433
出 版 物:《临床检验杂志》 (Chinese Journal of Clinical Laboratory Science)
年 卷 期:2004年第22卷第3期
页 面:172-174页
核心收录:
学科分类:1010[医学-医学技术(可授医学、理学学位)] 10[医学]
主 题:cRNA 标准曲线 实时RT-PCR检测 mRNA定量
摘 要:目的 建立一种新的基于LightCyclerTM技术 ,并通过构建cRNA标准曲线来对目的基因进行定量实时RT -PCR的检测方法。方法 以T7RNA聚合酶体外转录合成带有目的片段的cRNA作为标准品 ,并与样本同时进行反转录和PCR扩增 ,用此方法来检测目的基因在结直肠组织中的表达。结果 采用cRNA标准品制作的标准曲线具有较好的线性关系 (r0 .99) ,而且在每次实验中都能取得较好的扩增效率 ,CEA与GAPDH的扩增效率分别大于 88.7%和 87.4 %。结论 此方法能较为准确的对组织中的目的基因表达进行定量检测。