SETD2在猪卵母细胞体外成熟中的作用

作     者：高乐鹏 余思聪 刘双 马馨 李所 GAO Lepeng;YU Sicong;LIU Shuang;MA Xin;LI Suo

作者机构：吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 

出 版 物：《吉林农业大学学报》 (Journal of Jilin Agricultural University)

年 卷 期：2023年第45卷第3期

页      面：365-371页

学科分类：0907[农学-林学] 090705[农学-野生动植物保护与利用] 09[农学] 

基　　金：吉林省科技发展计划项目(20190103149JH) 吉林省教育厅项目(JJKH20220361KJ) 国家自然科学基金项目(31902162)。 

主　　题：SETD2 猪卵母细胞 H3K36me DNA损伤 

摘      要：SETD2是H3K36me3特异性甲基转移酶,参与组蛋白甲基化修饰,并通过调节多种基因的表达影响细胞功能。为探究SETD2在猪卵母细胞体外成熟(in vitro maturation,IVM)过程中的表达规律及作用,通过免疫荧光染色检测SETD2及H3K36me3在猪卵母细胞IVM过程中各个时期(GV、MⅠ、MⅡ期)的表达定位情况;在GV期显微注射SETD2干扰RNA(SETD2-siRNA)构建干扰模型,检测干扰后对SETD2、H3K36me3、DNA双链断裂标志物(γH2AX)以及第一极体(PBI)排出率的影响;通过qPCR技术检测干扰后对DNA甲基化转移酶DNMT3B、凋亡和抗凋亡相关基因BAX、BCL2表达的影响。结果表明:SETD2信号GV期聚集在DNA周围,MⅠ和MⅡ期均在细胞质中表达,而H3K36me3在整个减数分裂过程中均与核共定位;进一步研究发现,SETD2-siRNA干扰后显著降低了SETD2和H3K36me3表达水平,增加了γH2AX表达(P0.05),同时显著降低PBI排出率(P0.05);qPCR结果显示,SETD2-siRNA干扰后DNMT3B表达差异不显著,但BCL2表达水平显著下降,凋亡相关基因BAX显著升高(P0.05)。说明SETD2在卵母细胞体外成熟中起着重要作用,SETD2-siRNA干扰后降低H3K36me3甲基化水平,导致DNA断裂增加,引起细胞凋亡,影响猪卵母细胞IVM成熟效率及质量。